詳細介紹
人胚肺細胞VA13細胞;WI-38VA13亞系2RA價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
細胞名稱 人胚肺細胞VA13細胞;WI-38VA13亞系2RA價格
形態特性 成纖維細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細胞系衍生自WI-38細胞。WI-38細胞感染低滴度的SV40病毒,經過連續傳代、克隆選擇獲得多株亞系,其中2RA亞系含有SV40 neo (T)和轉移抗原,從而改變其有限細胞系的特性,可在常規條件下連續傳代。該細胞系的實驗操作甚少在生物安全P2級條件下進行。
培養條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C265
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
cAMP ELISA Kit 大鼠環磷酸腺苷Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-ARC/FITC 熒光素標記ARC抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM154A FAM154A蛋白抗體 規格 0.2ml
E-Cad(Mouse E-Cadherin) ELISA Kit 小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白 96T
Angiotensin II Type 2 Receptor 英文名稱: 血管緊張素Ⅱ2型受體相互作用蛋白抗體 0.1ml
Annexin A11 英文名稱: 膜粘連蛋白11抗體 0.2ml
Anti-ARC/FITC 熒光素標記ARC抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Visfatin-1 (PBEF1)(NT) Human 內脂素/內臟脂肪素(人:N端多肽)、內臟脂肪素、 又稱:前B細胞克隆增強因子、內肥素、腹脂素Multi-class antibodies規格: 0.5mg
Anti-ICAM-3/CD50 細胞間粘附分子-3抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh P2Y4 P2Y4受體抗體 規格 0.1ml
CD86 Kit Rat 大鼠 CD86 / B7-2 ELISA配對抗體 ELISA
T2R60 英文名稱: 味覺受體蛋白家族2亞基60抗體 0.2ml
C3orf26 英文名稱: 3號染色體開放閱讀框26抗體 0.2ml
Anti-ICAM-3/CD50 細胞間粘附分子-3抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
人晚期糖基化終末產物受體(RAGE/AGER)ELISA試劑盒人96T6.25-400 pg/mL小鼠細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒,英文名:Cyclin-D2 ELISA Kit人谷氨酸脫羧酶(GAD)ELISA試劑盒人96T0.39-25 ng/mL小鼠己糖激酶1(HK1)ELISA試劑盒,英文名:HK1 ELISA KiISA Kit for Human Hyaluronidase-4小鼠谷胱甘肽S轉移酶θ1(GSTθ1)ELISA試劑盒,英文名:GSTθ1 ELISA Kit人90kDa熱休克蛋白β1(HSP90β1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠蛋白磷酸酶3調節因子亞基1(PPP3R1)ELISA試劑盒,英文名:PPP3R1 ELISA Kit人干擾素調節因子3(IRF3)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠α白蛋白(AFM)ELISA試劑盒,英文名:AFM ELISA Kit人犬尿氨酸酶(Kynureninase)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠90kDa熱休克蛋白αA1(HSP90αA1)ELISA試劑盒,英文名:HSP90αA1 ELISA Kit人晚期角質化包膜蛋白3D (Late cornified envelope protein 3D)ELISA試劑盒人96T0.625-40 ng/mL大鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒,英文名:IGF-2 ELISA Kit
人和肽素(CPP)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠葡萄糖6磷酸脫氫酶(G6PD)ELISA試劑盒,英文名:G6PD ELISA Kit人DNA錯配修復蛋白MSH2(hMSH2)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠晚期氧化蛋白產物(AOPP)ELISA試劑盒,英文名:AOPP ELISA Kit人Myocardin(MYOCD)ELISA試劑盒人96T0.156-10 nmol/mL大鼠牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒,英文名:CIAP ELISA Kit人神經元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠巨噬細胞替代激活相關化學因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒,英文名:AmAC-1 ELISA Kit人磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸肌醇3-磷酸酶和雙特異性蛋白磷酸酶PTEN(PTEN)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠高遷移率族蛋白1(HMGB1)ELISA試劑盒,英文名:HMGB1 ELISA Kit人受磷蛋白(PLN)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠吡啶交聯物(PY)ELISA試劑盒,英文名:PY ELISA Kit人髓鞘脂蛋白脂質蛋白(PLP)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒,英文名:CXCR3 ELISA Kit
細胞核蛋白與細胞漿蛋白抽提試劑 100次
Phospho-ZAP70 (Tyr315 + Tyr319) 英文名稱: 磷酸化zeta相關蛋白70抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-c-Raf(Ser471) 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 規格 0.1ml
H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
phospho-DDX5 (Tyr593) 英文名稱: 磷酸化三磷酸腺苷依賴解旋酶ddx5抗體 0.1ml
Sox2 Sox2 鼠單抗 (FITC) Human
ANG II R-1(Human angiotension II receptor 1) ELISA Kit 人血管緊張素Ⅱ受體1Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-phospho-P53 (Ser46) 磷酸化抑制基因P53抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HSP20 熱休克蛋白-20抗體 規格 0.2ml
17-OHP(Mouse 17-Hydroxyprogesterone)ELISA Kit 小鼠17羥孕酮 96T
PEG3 英文名稱: PEG3蛋白抗體 0.1ml
phospho-CDK5(Tyr15) 英文名稱: 磷酸化周期素依賴性激酶5抗體 0.1ml
Anti-phospho-P53 (Ser46) 磷酸化抑制基因P53抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml