詳細介紹
細胞名稱 人二倍體細胞;HEL培養
形態特性 成纖維細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 HEL是一株人二倍體細胞系,具有典型的成纖維細胞形態,染色體2n=46。可用于作多種病毒的宿主,抗衰老藥物試驗等。
培養條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C19
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權限 A類
人二倍體細胞;HEL培養貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
F VII (Human coagulation factor VII ) ELISA Kit 人凝血因子ⅦMulti-class antibodies規格: 48T
Anti-Phospho-Progesterone Receptor (Ser190) 磷酸化孕激素受體抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HDLBP/vigilin 高密度脂蛋白結合蛋白抗體 規格 0.2ml
INH-A ELISA Kit 大鼠抑制素A 96T
AMPKγ2 英文名稱: 腺苷單磷酸活化蛋白激酶γ2抗體 0.2ml
C2orf49 英文名稱: 2號染色體開放閱讀框49抗體 0.2ml
Anti-Phospho-Progesterone Receptor (Ser190) 磷酸化孕激素受體抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
VK1 ELISA Kit 大鼠維生素K1Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-ADRA2/FITC 熒光素標記alpha-2腎上腺素能受體抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FECH/Ferrochelatase 鐵螯合酶抗體 規格 0.2ml
HL ELISA Kit 大鼠肝脂酶 96T
MYBPC1 英文名稱: 肌球蛋白結合蛋白C抗體 0.2ml
AX2R 英文名稱: 膜粘連蛋白2受體抗體 0.2ml
Anti-ADRA2/FITC 熒光素標記alpha-2腎上腺素能受體抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
人維生素D結合蛋白(DBP)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠抗肌萎蛋白(UTRN)ELISA試劑盒,英文名:UTRN ELISA Kit人高爾基蛋白73(GP73)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠晶狀體蛋白αB(CRYαB)ELISA試劑盒,英文名:CRYαB ELISA Kit人E3泛素蛋白連接酶HUWE 1(E3 ubiquitin-protein ligase HUWE1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)ELISA試劑盒,英文名:GAPDH ELISA KiISA Kit for Human Nicotinamide phosphoribosyltransferase大鼠降鈣素(CT)ELISA試劑盒,英文名:CT ELISA Kit吡啶酚(Pyridinoline)ELISA試劑盒通用96T6.25-400 nmol/L大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒,英文名:BMPR-Ⅱ ELISA KiISA Kit for Human Xaa-Pro dipeptidase大鼠蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒,英文名:PRG4 ELISA Kit人前胸腺素α(Prothymosin alpha)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒,英文名:IL-2sRβ ELISA Kit
人β氨基己糖苷酶β(HEXB)ELISA試劑盒人96T1.56-100 U/mL小鼠干擾素γ誘導單核因子(MIγ)ELISA試劑盒,英文名:MIγ ELISA KiISA Kit for Human Pyruvate kinase isozymes M1/M2大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒,英文名:NAG ELISA Kit人蛋白信號調節因子1(RGS1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠粒細胞巨噬細胞集落激因子(GMCSF/CSF2)ELISA試劑盒,英文名:GMCSF/CSF2 ELISA KiISA Kit for Human Syntenin-1大鼠音猬因子(SHH)ELISA試劑盒,英文名:SHH ELISA Kit人鋅指蛋白2(SNAI2)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠細胞絨毛蛋白(CVL)ELISA試劑盒,英文名:CVL ELISA KiISA Kit for Human Serpin B3大鼠神經生長因子誘導蛋白B(NGFIB)ELISA試劑盒,英文名:NGFIB ELISA Kit人皮質醇結合球蛋白ELISA試劑盒人96T39-2500 nmol/L大鼠硫酸肝素蛋白聚糖(HSPG)ELISA試劑盒,英文名:HSPG ELISA Kit
纖維素膜(15×60cm 0.45um) 1張 Pall-Gelman
ZNF312 英文名稱: 鋅指蛋白312抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-DDX58 (Ser8) 磷酸化DDX58抗體 規格 0.1ml
GAD-67 (glutamate decarboxylase 67) 谷氨酸脫羧酶-67抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
DCIR/CLEC4A 英文名稱: C型凝集素結構域家族4成員A抗體 0.2ml
CLEC7A Dectin-1 / CLEC7A 兔單抗 (PE) Mouse
Human thyroxineT4 ELISA Kit 人甲狀腺素Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-LY-96/MD-2 MD-2蛋白抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Kilham Rat Virus/KRV-VP1/KRV-VP2 (C-terminus) 基爾曼氏細小病毒VP1/VP2抗體(大鼠潛在病毒KRV)C端 規格 1ml
17-OHP ELISA Kit 大鼠17羥孕酮 96T
Protein C inhibitor 英文名稱: 蛋白C抑制因子抗體 0.1ml
CD4 英文名稱: CD4抗體 0.1ml
Anti-LY-96/MD-2 MD-2蛋白抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。