詳細介紹
細胞名稱 人胚肺二倍體細胞;2BS培養
形態特性 成纖維細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 人胚肺二倍體細胞,來自于女孩胚胎,1976年由北京生物制品研究所建株
培養條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 新生牛血清,10%;水解乳蛋白,10%
傳代方法 1:2-1:4
傳代情況 P21
凍存條件 基礎培養液+20%牛血清+10%DMSO
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:X; D7S820:8,11;CSF1PO:10,12;D13S317:8,11;D16S539:9,12;D18S51:14,17;D21S11:29,30;D3S1358:15;D5S818:11;D8S1179:11,13;FGA:19,22;PentaD:11,13;PentaE:7,11;TH01:7,9;TPOX:8,10;vWA:18
同工酶 人B,NP,G7PG,MD,AST
染色體
使用權限 A類
人胚肺二倍體細胞;2BS培養操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
Pro-ANP ELISA Kit 大鼠前心鈉肽Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-ATR/ACTR(phospho Ser428) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化ATR抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAHD2A 延胡索酰乙酰乙酸水解酶抗體 規格 0.2ml
PDGF-BB(Human Plaet-Derived Growth Factor-BB) ELISA kit 人血小板衍生生長因子BB 96T
7-Mar 英文名稱: 膜相關環指蛋白7抗體 0.1ml
ABLIM3 英文名稱: 肌動蛋白結合蛋白LIM蛋白3抗體 0.2ml
Anti-ATR/ACTR(phospho Ser428) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化ATR抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
ZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- middle (1b) 鋅指脂蛋白-1b(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
Anti-SIGLEC11 唾液酸結合性免疫球蛋白樣凝集素11抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Oncostatin M 癌基因蛋白抑瘤素M抗體 規格 0.2ml
NGF Kit Human 人 NGF / NGFB ELISA配對抗體 ELISA
T2R50 英文名稱: 味覺受體蛋白家族2亞基50抗體 0.2ml
Cytochrome P450 17A1 英文名稱: 細胞色素C P450 17A1抗體 0.1ml
Anti-SIGLEC11 唾液酸結合性免疫球蛋白樣凝集素11抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
人載脂蛋白L1(Apolipoprotein L1)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠乙酰膽堿酯酶(AchE)ELISA試劑盒,英文名:AchE ELISA KiISA Kit for Human Laminin subunit beta-1大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒,英文名:Free-T3 ELISA KiISA Kit for Human Molybdenum cofactor sulfurase大鼠細胞色素P4502E1(CYP2E1)ELISA試劑盒,英文名:CYP2E1 ELISA KiISA Kit for Human Mucin-20大鼠醛固酮(ALD)ELISA試劑盒,英文名:ALD ELISA KiISA Kit for Human Oxysterols receptor LXR-alpha大鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒,英文名:Gzms-A ELISA KiISA Kit for Human 2'-5'-oligoadenylate synthase 1大鼠胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)ELISA試劑盒,英文名:CSE ELISA KiISA Kit for Human Phosphatidylinositol 3, 4, 5-trisphosphate-dependent Rac exchanger 1 protein大鼠雌激素(E)ELISA試劑盒,英文名:E ELISA Kit
人花生四烯酸-15-脂加氧酶B(ALOX15B)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒,英文名:gp130 ELISA KiISA Kit for Human Podocalyxin大鼠Syndecan-1/CD138(SDC1)ELISA試劑盒,英文名:SDC1 ELISA KiISA Kit for Human Eosinophil cationic protein大鼠阻抑素(PHB)ELISA試劑盒,英文名:PHB ELISA KiISA Kit for Human NAD-dependent deacetylase sirtuin-1大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)ELISA試劑盒,英文名:PAI1 ELISA KiISA Kit for Human Serpin A12大鼠羥烷基輔酶A脫氫酶β(HADHβ)ELISA試劑盒,英文名:HADHβ ELISA KiISA Kit for Human Tumor necrosis factor ligand superfamily member 4大鼠基質金屬蛋白酶12(MMP12)ELISA試劑盒,英文名:MMP12 ELISA KiISA Kit for Human Tumor necrosis factor ligand superfamily member 8大鼠碘甲腺原氨酸脫碘酶Ⅲ(DIO3)ELISA試劑盒,英文名:DIO3 ELISA Kit
羊抗小鼠IgG-純化抗體 1mg/10mg 國產
XDH 英文名稱: 氧化酶抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-C-Myc(Thr373) 磷酸化致癌基因C-Myc抗體 規格 0.1ml
HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人類皰疹病毒8抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
Dynamin 3 英文名稱: 酶動力蛋白3抗體 0.1ml
Anti-phospho-4EBP1 (Ser65/Thr70) 磷酸化eIF4E結合蛋白抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
SRP(Human signal recognization particle antibody) ELISA Kit 人抗信號識別顆粒抗體Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-IGFBP3 胰島素樣生長因子結合蛋白3抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MAL/MPV17 T淋巴細胞成熟相關蛋白抗體 規格 0.2ml
1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3(Human 1,25-dihydroxyvitamin D3) ELISA Kit 人1,25二羥基維生素D3 96T
RNF39 英文名稱: 環指蛋白39抗體 0.2ml
CNPase 英文名稱: C型鈉尿肽抗體 0.1ml
Anti-IGFBP3 胰島素樣生長因子結合蛋白3抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml