詳細介紹
細胞名稱 人胚肺成纖維細胞;CCC-HPF-1培養
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 取材自引產的15周胚胎組織,中國醫學科學院基礎醫學研究所細胞資源中心建立。
培養條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代;3~4天1次。
傳代情況 P9
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12;D13S317:8;D16S539:12;D18S51:13,20;D19S433:14.2,16.2;D21S11:29,32.2;D2S1338:19,20;D3S1358:14,15;D5S818:12,13;D7S820:10;D8S1179:13,14;FGA:21,23;TH01:7,9;TPOX:9,10;vWA:16;
同工酶
染色體 46,XY
使用權限 A類
人胚肺成纖維細胞;CCC-HPF-1培養貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
ANG-2 ELISA Kit 大鼠血管生成素2Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-AR/FITC 熒光素標記雄激素受體抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM161B FAM161B蛋白抗體 規格 0.2ml
AIF ELISA Kit 大鼠凋亡誘導因子 96T
(2F11) 英文名稱: 單克隆抗體 0.1ml
phospho-alpha 1 Sodium Potassium ATPase (Tyr260) 英文名稱: 磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體 0.1ml
Anti-AR/FITC 熒光素標記雄激素受體抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
重組K3蛋白 重組K3蛋白Multi-class antibodies規格: 0.5mg
Anti-IL-2R gamma/CD132 白介素2受體γ鏈抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PAK2 p21激活激酶2抗體 規格 0.1ml
ACRV1 Kit Human 人 ACRV1 ELISA配對抗體 ELISA
TSPAN3 英文名稱: 四分子交聯體3抗體(四旋蛋白) 0.2ml
CNTNAP4 英文名稱: 接觸蛋白相關蛋白4抗體 0.1ml
Anti-IL-2R gamma/CD132 白介素2受體γ鏈抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
脂氧素B4(Lipoxin B4)ELISA試劑盒通用96T1.56-100 ng/mL大鼠腫瘤壞死因子γ(TNF-γ)ELISA試劑盒,英文名:TNF-γ ELISA KiISA Kit for Human C-C chemokine receptor type 1小鼠白介素35(IL-35)ELISA試劑盒,英文名:IL-35 ELISA KiISA Kit for Human C-opeptide of Collagen alpha-1(I) chain小鼠B細胞淋巴瘤-XL(Bcl-xl)ELISA試劑盒,英文名:Bcl-xl ELISA KiISA Kit for Human Dimethylglycine dehydrogenase, mitochondrial小鼠棕櫚酰化膜蛋白6(MPP6)ELISA試劑盒,英文名:MPP6 ELISA KiISA Kit for Human Serine/threonine-protein kinase/endoribonuclease IRE1小鼠硝基酪氨酸(NT)ELISA試劑盒,英文名:NT ELISA KiISA Kit for Human Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A小鼠上皮性鈣黏附蛋白(CDHE)ELISA試劑盒,英文名:CDHE ELISA KiISA Kit for Human Gremlin-1小鼠醌NADH脫氫酶1(NQO1)ELISA試劑盒,英文名:NQO1 ELISA Kit
人胃脂肪酶(LIPF)ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL大鼠血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒,英文名:aGT ELISA KiISA Kit for Human 5-hydroxytryptamine receptor 1B小鼠谷氨酰胺合成酶(GS)ELISA試劑盒,英文名:GS ELISA KiISA Kit for Human Interferon-induced transmembrane protein 3小鼠補體成分4b(C4b)ELISA試劑盒,英文名:C4b ELISA KiISA Kit for Human Immunoglobulin A小鼠N-乙酰半乳糖胺酶α(NAGα)ELISA試劑盒,英文名:NAGα ELISA KiISA Kit for Human Kallikrein-2大鼠腫瘤轉移抑制基因KISS1蛋白(KISS1/Kisspeptin 1)ELISA試劑盒,英文名:KISS1/Kisspeptin 1 ELISA KiISA Kit for Human Leukemia inhibitory factor receptor大鼠血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA試劑盒,英文名:ANG-R-Tie1 ELISA KiISA Kit for Human Max dimerization protein 1大鼠瘦素(Leptin)ELISA試劑盒,英文名:Leptin ELISA Kit
總RNA抽提試劑 100ml 國產
ZA20D3 英文名稱: 鋅指蛋白20D3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-CREB-1(Ser142) 磷酸化CREB-1抗體 規格 0.1ml
phospho-GSK3 Alpha/ Beta(alpha + beta)(phospho Tyr279 + Tyr216) 磷酸化葡萄糖合成激酶3α/β抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
DLX2 英文名稱: 同源轉錄因子DLX2抗體 0.2ml
SCARB2 LIMP-2 / SCARB2 / CD36L2 兔單抗 (PE) Mouse
Apo-H(Mouse Apolipoprotein H) ELISA Kit 小鼠載脂蛋白HMulti-class antibodies規格: 48T
Anti-CASP4/FITC 熒光素標記半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ELOVL2 長鏈脂肪酸延長酶ELOVL2抗體 規格 0.2ml
(ADAM9)ELISA Kit 大鼠解整合素樣金屬蛋白酶9 96T
Myozenin 1 英文名稱: MYOZ抗體 0.2ml
phospho-AKT1 + AKT2 + AKT3 (Thr308+Thr309+Thr305) 英文名稱: 磷酸化蛋白激酶B抗體 0.1ml
Anti-CASP4/FITC 熒光素標記半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。