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T4 DNA連接酶產品詳情:
T4 DNA連接酶
英文名稱:T4 DNA Ligase
CAS號:9015-85-4
分子量:55.3kDa,單體
級別:BR
來源:含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌
活性定義:是指在ATP-PPi交換反應中,37℃、30分鐘內將1nmol [32PPi]轉換為Norit可吸收形式所需的酶量(weiss單位,1個weiss單位相當于約200個粘性末端連接單位。1個粘性末端連接單位:20ul反應體系(50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端)中,在16℃、30分鐘內連接50%連接HindIII酶切的Lambda DNA 產物所需的酶量)
抑制劑:當反應體系中NaC1或KC1的濃度超過200 mM時,可強烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活:65℃加熱10分鐘或70℃加熱5分鐘
注意:T4 DNA Ligase與DNA結合會改變條帶的瓊脂糖凝膠電泳遷移率,為避免此現象,電泳前需處理樣本或分子量標準。樣本處理如下:樣本與Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液(#R1151)混合,75℃加熱5分鐘或65℃加熱10分鐘后冰浴保存;轉化時,連接產物的體積不得超過感受態細胞體積中的10%;電轉化之前,先用氯方抽提方法除去連接混合物中的T4 DNA Ligase,然后經乙醇沉淀純化抽提產物
質量控制:測試表明無內切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能檢測:粘性末端或平末端DNA的連接能力
性狀(以下信息僅供參考):液體。該酶催化雙鏈DNA或RNA中毗鄰的5'磷酸基團和3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵,還可以修復雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA復合體中的單鏈切口,連接DNA的粘性和平末端,但該酶對單鏈核酸無酶活性。該酶需要輔因子ATP
用途:本品僅供科研,不得用于其它用途。(以下用途僅供參考)粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接;雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接;雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA復合體中缺口的修復;連接酶介導的RNA檢測;位點特異性突變;擴增片段長度多態性
保存: -20°C
T4 DNA連接酶穩定性判斷原則:
1.無機化合物,只要妥善保管,包裝完好無損,可以長期使用。但是,那些容易氧化、容易潮解的物質,在避光、蔭涼、干燥的條件下,只能短時間(1~5年)內保存,具體要看包裝和儲存條件是否合乎規定。
2.有機小分子量化合物一般揮發性較強,包裝的密閉性要好,可以長時間保存。但容易氧化、受熱分解、容易聚合、光敏性物質等,在避光、蔭涼、干燥的條件下,只能短時間(1~5年)內保存,具體要看包裝和儲存條件是否合乎規定。
3.有機高分子,尤其是油脂、多糖、蛋白、酶、多肽等生命材料,極易受到微生物、溫度、光照的影響,而失去活性,或變質,故此,要冷藏(凍)保存,而且時間也較短。
4.基準物質、標準物質和高純物質,原則上要嚴格按照保存規定來保存,確保包裝完好無損,避免受到化學環境的影響,而且保存時間不宜過長。一般情況下,基準物質必須在有效期內使用。
試劑提純方法:
①蒸餾。對于易揮發的試劑,如常用的無機酸,有機溶劑等是最常用的提純方法。根據沸點的高低選用常壓或減壓蒸餾法。
②升華。對于某些易升華的試劑,如碘、萘等,此法最簡便。
③重結晶。適用于大多數固體試劑的提純,其關鍵是選擇好合適的溶劑。
④溶劑萃取。無論將母體或雜質萃取到有機溶劑相中,均可達到提純的目的。
⑤離子交換色譜分離。是一種新型的高效提純方法,例如,用陰離子交換樹脂吸附清除鹽酸中的鐵(FeCl4-)。此外,還有薄層層析、電滲析、區域熔融、離子交換膜等特殊手段來分離提純化學試劑。
我們還提供:
L-ProlinolL-(+)-羥甲基吡咯烷1克BR,98%
99-64-94-二甲基本3-(Dimetxylamino)benzoic acid
CCDA基礎shēng huà shì jì容量:500毫升
對鹽酸鹽 p-Tolylhydr hydrochloride,≥98.0% 637-60-5 5G 通用試劑
酸鈉 Sodium chlorate,ACS reagent (≥99.0%) 7775-9-9 100G 通用試劑
脫氧瓜萎鐮菌醇,英文名或英文縮寫:Deoxynivalenol,級別:BR,90%,規格:100克
305-53-3乙酸鈉;醋酸鈉wo7ium iodoacetate
2-Acetyl-3,4-dixy7no-5,8-dimetxoxynepxtxelene 75251-98-8
鎵(III)水合物 Gallium nitrate hydrate,≥99.999% 69365-72-6 1G 多肽試劑
正辛酸1克
微量可調移液器P1000 支 Gilson原裝
OCTYL-THIOGLUCOSIDE辛基-β-D-硫代葡萄糖苷超純級白色固體FRZsigma
聚烯亞安 50% in water POLYqTHYLqNqIMINq, BRcNCHqD 900-98-6
乙醛脫氫酶/Aldehyde Dehydrogenase, potassium-activated BR,2u/mg 25U 國產/進口
反式-1,2-環己二胺四乙酸/反-1,2-環己二胺-N,N,N,N-四乙酸/1,2-環己二胺四乙酸/反式-1,2-二基環己烷-N,N,N′,N′-四乙酸/DCTA/CyDTA BR,98% 25/100克 國產/進口
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