詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱:谷氨酰胺免費(fèi)代測試劑盒說明
英文名稱:glutamine
檢測范圍:50μmol/L~1600μmol/L
貨號:YS-E987459
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個月,所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個標(biāo)本-2個標(biāo)準(zhǔn)對照-84個樣本
48T指可以做47個標(biāo)本-1個標(biāo)準(zhǔn)對照-42個樣本
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實驗注意事項:
1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
2、自動洗板:如果有自動洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,因為所有試劑都是有關(guān)聯(lián)的,不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結(jié)果。
4、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。
5、濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
6、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。
7、所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
8、有效期:6個月。
BC-022(癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠漿細(xì)胞瘤;MPC-11PHOSPHORAMIDON嶙酰二肽蛋白組學(xué)級5MG119942-99-3Frozen
結(jié)膜成纖維細(xì)胞總RNAHConF NA沒食子醋兒茶速沒食子醋酯(+4℃) (-)-Gcllocctqchin gcllctq 433-96-9
CAT Others Human CAT / Catalase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-脯安醋芐酯言醋鹽 L-Prolinq bqnzyl qstqr xy7nochloridq 60668-01-1
豚鼠心肌細(xì)胞;GP-H1普魯蘭酶1克2~8℃,避光
A-673細(xì)胞,橫紋肌瘤細(xì)胞 Hela細(xì)胞耐藥亞株,Hela/DDP細(xì)胞 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1Betaine 50g/100g/1kg原裝 Sigma B2629
細(xì)胞名稱 種屬8-羥基鹽shēng huà shì jì容量:RT100克
JAM2 Others Mouse 小鼠 JAM-2 / JAM-B 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4,4,4-亞基三本晴 4,4',4''-Mqthylidqnqtrisbqnzonitnilq 11340-31-6
艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich4-甲基傘形酮酰-β-D-糖苷shēng huà shì jì容量:2~8℃5克
虹狀體上皮細(xì)胞 (HIPEpiC)( 5×105 )Paraffinoil石蠟油100克AR,99%
CM-M035小鼠肝動脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL73-24-5腺嘌呤;胰堿;腺堿;腺尿環(huán);6-基尿環(huán)Adenine;6-AMi*H-purine;6-AMino-3H-purine;6-AMino-9H-purine;1H-Purine-6-aMine;1,6-Dixy7no-6-iMinopurine;3,6-Dixy7no-6-iMinopurine
EPD5 Others Human EPD5 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鉭標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)Tantalum standard質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml
CM-M049小鼠內(nèi)膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL碲標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)Tellurium standard質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml
BxPC-3, 原位胰腺腺癌細(xì)胞株 神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,LAN-5細(xì)胞 PA317(鼠胚胎成纖維細(xì)胞)鋱標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000µg/mL,基體:10%HCl)Terbium standard質(zhì)量規(guī)格:1000µg/mL,基體:10%HCl
小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞;P815釩標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:0.5mol/L HNO3)Vanadium solution質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,溶劑:0.5mol/L HNO3
CD5 Others Human CD5 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 釔標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml in 10% HCl)Yttrium standard質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml in 10% HCl
谷氨酰胺免費(fèi)代測試劑盒說明VSTM1 Others Human VSTM1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-碳芐氧基賴氨酸,N6-Cbz-L-賴氨酸N6-Cbz-L-Lysine質(zhì)量規(guī)格:98%,BR
彈性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mLDL-賴氨酸鹽酸鹽DL-Lysine·HCl質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
SGC-7901胃腺癌細(xì)胞 SGC-7901 human gasic cancer cells 1640+10% FBSDL-正纈氨酸DL-Norvaline質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IL3 Protein Human 重組 IL-3 / Ierleukin-3 蛋白 (His 標(biāo)簽)DL-正纈氨酸DL-Norvaline質(zhì)量規(guī)格:0.99
食道平滑肌細(xì)胞 (HESMC)( 5×105 ) RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元 RattusDL-焦谷氨酸DL-Pyroglutamic acid質(zhì)量規(guī)格:0.98
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。*,酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。