細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
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產(chǎn)品名稱:JEG-3(人絨毛膜癌細(xì)胞)
規(guī)格:5×106cells
貨號(hào):YS-02X9636
產(chǎn)品分類:細(xì)胞系
儲(chǔ)存條件2℃-8℃,避光儲(chǔ)存
運(yùn)輸條件冰袋冷藏運(yùn)輸
注意事項(xiàng)
1、使用產(chǎn)品時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作,避免污染。
2、本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3、為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果,不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4、所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5、本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè); 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái);
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
1:水浴鍋預(yù)熱至37℃?zhèn)溆?/span>
2:準(zhǔn)備15mL離心管,并向其中加入適量培養(yǎng)基待用
3:將細(xì)胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出,放入PE手套中,迅速投入水浴鍋
4:用力搖晃凍存管,使其在1分鐘內(nèi)融化
5:用紙巾擦拭水漬,轉(zhuǎn)移至生物安全柜。用移液槍吸取細(xì)胞懸液,緩慢滴加到步驟2中準(zhǔn)備好的離心管
6:1200rpm離心3分鐘
7:棄上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,接種至新的無(wú)菌培養(yǎng)器皿中
對(duì)氨基水楊鈉 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 100mg 化真核延伸因子激2抗體 CPT2 ELISA Kit 肉毒堿棕櫚酰基轉(zhuǎn)移2(CPT2)ELISA試劑盒
富勒提取物,C60(含約20%的C70),巴克球提取物 質(zhì)量規(guī)格:>70.0%(HPLC) ullerene Extract, C60 (contains ca. 20% C70) 蘇云金芽胞桿莫氏變種 Bacillus thuringiensis var. merrisoni龜裂鏈霉 Streptomyces rimosus
水仙苷 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 10mg 細(xì)胞分裂周期蛋白6抗體 THBS4 ELISA Kit 血小板反應(yīng)蛋白4(THBS4)ELISA試劑盒
魚腥草油 英文名稱:Volatile oil 保存:-20℃ 規(guī)格:0.2ml 過(guò)氧化還原3抗體
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阿多弗林堿 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 10mg N-酰半乳糖胺糖蛋白3、β-半乳糖轉(zhuǎn)移1抗體 NAG ELISA Kit N-酰-β-D-氨基葡萄糖苷(NAG)ELISA試劑盒
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MK-2866 質(zhì)量規(guī)格:>99% Ostarine,GTx-024 T-24(人膀胱細(xì)胞)NCI-H358(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)
鄰氧基桂;2-Methoxycin 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 20mg 化粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體β抗體 DPYD ELISA Kit 二嘧脫[NADP+](DPYD)ELISA試劑盒
JEG-3(人絨毛膜癌細(xì)胞)641-12-3 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
26833-87-4高三尖杉酯 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
金黃色葡萄球菌 規(guī)格: 凍干粉
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35286-59-0地榆皂Ⅱ 規(guī)格: 20mg
鹿茸(馬鹿) 規(guī)格: 0.5g
461-58-5胺-對(duì)照品;有報(bào)告 規(guī)格: 100mg
78281-02-4基紅花黃色A 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
槐角 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
20547-45-9雞屎藤 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg