1.1 采樣時間

在消毒處理后或懷疑與醫院感染暴發有關時進行采樣。

1.2 采樣方法

用5cm×5cm滅菌規格板放在被檢物體表面，用浸有無菌0.03mol／L磷酸鹽緩沖液（PBS）或生理鹽水采樣液的棉拭子1支，在規格板內橫豎往返各涂抹5次，并隨之轉動棉拭子，連續采樣4個規格板面積，被采面積<100cm²，取全部表面；被采表面≥100 cm²，取100 cm²，減去手接觸不分，將棉拭子放入裝有10ml采樣液的試管中送檢。門把手等小型物體則采用棉拭子直接涂抹物體采樣。若采樣物體表面有消毒劑殘留時，采樣液應含相應中和劑。

1.4 檢測方法

把采樣管充分振蕩后，取不同稀釋倍數的洗脫液1.0ml接種平皿，將冷至40℃～45℃的熔化營養瓊脂培養基每皿傾注15ml～20ml，36℃±1℃恒溫培養箱48h，計數菌落數，懷疑與醫院感染暴發有關時，進行目標微生物的檢測。

1.5 結果計算

1.5.1物體表面菌落總數（CFU／cm²）

1.5.2小型物體表面的結果計算，用CFU/件

7. 消毒液的監測

6.1常用消毒液有效成分含量測定

庫存消毒劑的有效成分含量依照產品企業標準進行檢測，使用中消毒液的有效濃度測定可用上述方法，也可使用經國家衛生行政部門批準的消毒劑濃度試紙（卡）進行監測。

6.2使用中消毒液染菌量測定

6.2.1監測方法

6.2.1.1用無菌吸管按無菌操作方法吸取1.0ml被檢消毒液，加入9ml中和劑中混勻。醇類于酚類消毒劑用普通營養肉湯中和，含氯消毒劑、含碘消毒劑和過氧化物消毒劑用含量0.1％硫代硫酸鈉中和劑，洗必泰、季銨鹽類消毒劑用含0.3％吐溫80和0.3％軟磷脂中和劑，醛類消毒劑用含0.3％甘氨酸中和劑，含有表面活性劑的各種復方消毒劑可在中和劑中加入吐溫80至0.3％，也可使用該消毒劑消毒效果檢測的中和劑鑒定試驗確定的中和劑。

6.2.1.2用無菌吸管吸取一定稀釋比例的中和后混合液1.0ml接種平皿，將冷至40℃-45℃的熔化營養瓊脂培養基每皿傾注15ml-20ml，36℃±1℃恒溫箱培養72h，計數菌落數，懷疑與醫院感染暴發有關時，進行目標微生物的檢測。消毒液染菌量計算見式：

消毒液染菌量（CFU／ml）＝平均每皿菌落數×10×稀釋倍數 ……

6.2.2結果判斷

使用中滅菌用消毒液：無菌生長；使用中皮膚黏膜消毒液染菌量≤10CFU／ml，其他使用中消毒液染菌量≤100CFU／ml。

6.3注意事項

采樣后4h內檢測