詳細介紹
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。本試劑盒不但準確、快速、靈敏,還具有以下
產(chǎn)品名稱 | 通用進口PCR試劑 |
英文名稱 | LentivirusRTPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
皮生長因子受體抗體 REN ELISA Kit 腎素(REN)ELISA試劑盒
Ets轉(zhuǎn)錄因子家族ets1抗體 AMR ELISA Kit 腎上腺髓質(zhì)素受體(AMR)ELISA試劑盒
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內(nèi)皮素受體A抗體 ADRα2C ELISA Kit 腎上腺素能受體α2C(ADRα2C)ELISA試劑盒
表皮生長因子受體抗體 ADRα1A ELISA Kit 腎上腺素能受體α1A(ADRα1A)ELISA試劑盒
表皮生長因子受體抗體 WT1 ELISA Kit 腎母細胞瘤蛋白1(WT1)ELISA試劑盒
早期生長應(yīng)答蛋白1抗體 RNLS ELISA Kit 腎酶(RNLS)ELISA試劑盒
表皮膜蛋白1抗體 NPNT ELISA Kit 腎連蛋白(NPNT)ELISA試劑盒
內(nèi)皮細胞受體蛋白酪氨酸激酶A抗體 NPHP4 ELISA Kit 腎結(jié)核蛋白4(NPHP4)ELISA試劑盒
酪氨酸蛋白激酶A4抗體 CLK
NFAT5)ELISA Kit Rat nuclear factor of activated T-cells 5,NFAT5 ELISA Kit
大鼠Toll樣受體9(TLR9)ELISA Kit Rat Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISA kit
大鼠Toll樣受體7(TLR-7)ELISA Kit Rat toll-like receptor 7,TLR-7 ELISA Kit
大鼠toll樣受體3(TLR3)ELISA Kit Rat toll-like receptor 3,TLR3 ELISA kit
大鼠toll樣受體1(TLR1)ELISA Kit Rat toll-like receptor 1,TLR1 ELISA kit
通用進口PCR試劑大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)ELISA Kit Rat TGF-beta-inducible early response gene-1,TIEG1 ELISA Kit
1 ELISA Kit 腎膠原凝集素1(CLK1)ELISA試劑盒
前列腺素E受體3抗體 NPHP7 ELISA Kit 腎胱素7(NPHP7)ELISA試劑盒
雌激素受體α抗體 NPHP5 ELISA Kit
Q-PCR技術(shù):
實時熒光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR,是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光標記物,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過擴增曲線對未知模板進行定量分析的方法。熒光定量PCR不僅實現(xiàn)真正實現(xiàn)了定量,而且具有靈敏度和特異性、高能實現(xiàn)多重反應(yīng)、自動化程度高、無污染、實時和準確等特點。
熒光定量PCR所使用的熒光基團可分為兩種:熒光探針和熒光染料。
1.使用SYBR熒光染料法來進行熒光定量PCR時,我們首先在PCR反應(yīng)體系中加入過量SYBR熒光染料。SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后發(fā)射一定量的熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
2.Taqman探針則是利用探針與模板的特異性結(jié)合的特點,以及探針內(nèi)熒光報告基團和淬滅基團的分子特性來實現(xiàn)對PCR進行定量檢測。這種方法可以實現(xiàn)高靈敏度,嚴格針對特定堿基序列的定量實驗。