化工儀器網
詳細介紹
產品屬性：
中文名稱：線粒體超氧化物染色試劑盒-M13
英文名稱：
產品規格：30T|50T
發貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研
商品介紹：
M13線粒體超氧化物染色/檢測試劑盒是利用M系列探針進行線粒體超氧化物特異性染色的試劑盒。本試劑盒中的M13線粒體超氧化物染色探針為紅色熒光標記的線粒體探針，具有510/580nm 的大激發/發射波長。 M13線粒體超氧化物染色探針是一種細胞滲透型的對活細胞中的線粒體體進行選擇性染色的一類新型熒光染料，該探針可以選擇性標記線粒體，包含標記線粒體的弱巰基反應性的氯甲基官能團。只需簡單孵育細胞，即可穿過細胞膜并直接聚集在活性線粒體上。一旦進入線粒體后，快速被超氧化物氧化，并產生紅色熒光。M13線粒體超氧化物染色探針只可被超氧化物氧化，而不被其他活性氧類(ROS)和活性氮類(RNS)氧化。氧化產物結合核酸后，可產生大量紅色熒光。 儲存條件：染料-20℃避光保存；避免反復凍融；稀釋液2-8℃保存。 按每個樣用200μl染料計，試劑盒可以做30-150個樣或60-300個樣； 按每個樣用100μl染料計，試劑盒可以做60-300個樣或120-600個樣。 有效期：六個月。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
節裂角茴香（標準品）英文名稱： Amberlyst 15 ion-exchange resinG基丁受體γ1/GABAA Rγ1抗體包裝1g
結石草（標準品）英文名稱： Amberlite® IRA-900磷化γ基丁γ2受體抗體包裝250mg
介芬英文名稱： Amberlite® XAD16G基丁受體γ3/GABAA Rγ3抗體包裝5g
芥子（標準品）英文名稱： AramiteG基丁受體ε/GABAA Rε抗體包裝100ml
芥子堿英文名稱： Aramite solutionγ-基丁受體相關蛋白抗體包裝25ml
芥子堿硫鹽（標準品）英文名稱： Aramite solutionG基丁A型受體θ/GABAA Rθ抗體包裝1g
金合歡;槐（標準品）英文名稱： AnilofosG基丁A型受體rho1 /GABAA Rρ1抗體包裝5g
金蓮花（標準品）英文名稱： Amberlite® IRA-410 ion-exchange resinG基丁A型受體rho2 /GABAA Rρ2抗體包裝25g
金毛耳草(黃毛耳草）（標準品）英文名稱： Ammonium phosphate monobasicG基丁B型受體結合蛋白抗體包裝5g
金錢草（標準品）英文名稱： Ammonium phosphate monobasic谷受體δ1/GluR-δ1抗體包裝10g
金蕎麥（標準品）英文名稱： Amberlite® XAD7HP谷受體相關蛋白1抗體包裝2.5g
金雀花堿,野靛堿（標準品）英文名稱： Amberlite XAD4環磷鳥苷門控通道蛋白CNG4抗體包裝1g
金石蠶苷（標準品）英文名稱： trans-Anethole甘受體α1+甘受體α2抗體包裝25g
金絲桃苷(標準品)英文名稱： Behenic acid甘受體α3/GlyR α3抗體包裝5g
金絲桃(標準品)英文名稱： tert-Butyl ethyl etherG蛋白偶聯受體C5家族亞型D抗體包裝1g
藤黃微球菌Micrococcus│luteus 質量規格：進分sigma M6545去唾液糖蛋白受體試劑盒鳥苷;Guanosine
銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質量規格：>98%,USP,可用于培養去腎上腺試劑盒尿;Urea
三色青霉Penicillium│tricolor 質量規格：HPLC>98%,標準品趨化因子受體3試劑盒尼奧林;Neoline，Bullatin
線粒體超氧化物染色試劑盒-M13長枝木霉 10058-F4ATP合亞基OElisa
枯草芽孢桿 5-氟-2-甲基糜蛋白Elisa
毛栓孔 科里內酯組蛋白Elisa
藍微褐鏈霉 Phe-Ala乳酸脫氫BElisa
紫紅鏈霉 1-(4-)哌鹽酸鹽雷帕霉靶蛋白C1Elisa
節桿 環己烷丁酸鋁二乙酰基轉移Elisa
猴頭 2,3',6-三氯聯苯精脒;精N1-乙酰基轉移1Elisa
尖頂鹽單胞 甲中噴布特羅溶液標準物質精脒;精N1-乙酰基轉移1Elisa
嗜果黑星 2-氯-1,3-二氟苯乙型腦炎病Elisa
糞腸球 腺苷2′:3′-循環磷酸鈉鹽原纖維蛋白-1Elisa
努比鹵地無氧芽孢桿 [3-(trifluoromethyl)phenyl]hydrazine肉堿棕櫚酰基轉移1αElisa
草酸青霉 1-氯-3-甲氧基烷β淀粉樣蛋白25-35Elisa
卡伍爾鏈霉 7-甲氧基-3,7-二甲基辛腎上腺能受體β激1Elisa
擬胞囊 異辛烷中PCB138溶液白介30Elisa
多主葡萄殼 7-甲氧基-1-茚酮肌纖蛋白Elisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
化工儀器網