公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PERK抑制劑(GSK2606414)
英文名稱:GSK2606414
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
英文名稱:GSK2606414 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg GSK2606414是一種具有選擇性的PERK抑制劑,IC50值為0.4nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1337531-36-8 純度:99.18% 分子量:451.44 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
鮑比氏鏈霉菌鈣調(diào)節(jié)蛋白-1抗體Human ANXA4(Annexin A4) ELISA Kit人肝生長(zhǎng)因子激活物(HGFA)免疫試劑盒
塔賓曲霉半胱蛋白蛋白-6抗體(C端)Human TNNT3(Troponin T, fast skeletal muscle) ELISA Kit人肝生長(zhǎng)因子(HGF)免疫試劑盒
易變鏈霉菌周期A2抗體Human RAB11A(Ras-related protein Rab-11A) ELISA Kit人肝核因子1β(HNF-1B)免疫試劑盒
產(chǎn)克雷伯氏菌鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激2α抗體Human RELB(Transcription factor RelB) ELISA Kit人肝-血小板因子4復(fù)合物抗體(IgG)免疫試劑盒
唐菖蒲伯克霍爾德氏菌鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激2b/2γ抗體Human UCHL1(Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase isozyme L1) ELISA Kit人肝結(jié)合EGF樣生長(zhǎng)因子(HBEGF)免疫試劑盒
釀酒酵母凋亡敏感性基因抗體Human PA2G4(ProlifeRation-associated protein 2G4) ELISA Kit人肝輔因子II-凝血(HCII-T)復(fù)合物免疫試劑盒
鏈霉菌天冬-胱特異性蛋白家族抗體Human PDXP(Pyridoxal phosphate phosphatase) ELISA Kit人肝輔因子Ⅱ(HCⅡ)免疫試劑盒
丁梭菌(20-30天)半胱蛋白-10抗體Human OAS3(2′-5′-oligoadenylate synthase 3) ELISA Kit人肝X受體β(LXRβ)免疫試劑盒
異常漢遜酵母半胱蛋白蛋白-12抗體Human PRDX6(Peroxiredoxin-6) ELISA Kit人肝X受體α(LXRα)免疫試劑盒
土星擬威爾酵母subsufficiens變種半胱蛋白蛋白-13抗體Human TTN(Titin) ELISA Kit人桿狀病IAP重復(fù)包含蛋白2/3(BIRC2/3)免疫試劑盒
塔賓曲霉CD10抗體Human FSCN1(Fascin) ELISA Kit人甘油三酯(TG)免疫試劑盒
托魯斯山鏈霉菌CD105抗體Human TPI1(Triosephosphate isomerase) ELISA Kit人甘油-3 - 磷脫氫(GAPDH/G3PDH)免疫試劑盒
香菇干生長(zhǎng)因子受體/表面分化抗原抗體Human RNASE3/ECP(Ribonuclease A3/Eosinophil Cationic Protein) ELISA Kit人甘油二酯(DAG)免疫試劑盒
中慢生華癸根瘤菌離子通道蛋白2抗體Human PDXK(Pyridoxal kinase) ELISA Kit人甘露糖受體(MR)免疫試劑盒
大腸埃希菌角蛋白5抗體Human POMGNT1(Protein O-linked-mannose beta-1,2-N-acetylglucosaminyltransferase 1) ELISA Kit人甘露糖凝集受體(MBLR)免疫試劑盒
納西桿菌角蛋白8抗體Human HMGCS1(Hydroxymethylglutaryl-CoA synthase, cytoplasmic) ELISA Kit人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集(MBP/MBL)免疫試劑盒
深紅酵母Rhodotorula│rubra 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品洋艾
盤(pán)多毛孢霉Pestalotia│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%竹節(jié)參皂苷ⅣA
正青霉屬Eupenicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,97.5%絡(luò)石苷
PERK抑制劑(GSK2606414)霍氏腸桿 4-(乙氨甲基)吡啶三磷酸磷脂酰肌Elisa
芽胞桿 2-乙氧基環(huán)己酮胸腺肽α1Elisa
短小芽孢桿 2--4-羥基苯甲Coll2-1Elisa
三寶壟根霉 4-氨基-3-苯PP2A癌癥抑制抑制因子Elisa
釀酒酵母 1-溴-4-(三氟甲基硫代)苯非酯化脂肪酸Elisa
季也蒙邁耶氏酵母 9,9-二甲基芴-2-酸(含數(shù)量不等的酸酐)異腎上腺Elisa
薄花邊傘1-5 對(duì)磷酸二鈉六水合物(PNPP)神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白2Elisa
蛹蟲(chóng)草 2-氨基-5-吡磷酸化核轉(zhuǎn)錄因子p65Elisa
燕麥?zhǔn)人嵛鞴蟻喎N* 2-氨基-6-吡凝血原前體片段F2Elisa
皮生毛霉 5-吡-2-羧酸甲酯血鈣Elisa
大腸桿 三氟磺酸甲酯神經(jīng)肽1Elisa
產(chǎn)黃青霉 三氟磺酸甲酯維生D結(jié)合蛋白Elisa
佛雷德里克斯堡假單胞 雙(三環(huán)己基磷)鈀(0)乙酰化Elisa
鞘氨盒屬 BOC-L-4-氨酸水通道蛋白2抗體Elisa
黑木耳 1-甲基-L-組氨酸水通道蛋白3抗體Elisa