產(chǎn)品屬性:
中文名稱:c-Met和ALK抑制劑(Crizotinib)
英文名稱:Crizotinib
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
英文名稱:Crizotinib 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg Crizotinib是一種有效的c-Met和ALK的抑制劑,IC50值分別為11nM和24nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:877399-52-5 別名:PF-02341066 純度:99.97% 分子量:450.34 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
地衣芽孢桿菌20號染色體開放閱讀框141抗體Human ANGPTL2(Angiopoietin-related protein 2) ELISA Kit人胱抑F(CST7)免疫試劑盒
馬闊里類芽孢桿菌20號染色體開放閱讀框160抗體Human OGDH(2-oxoglutaRate dehydrogenase, mitochondrial) ELISA Kit人胱抑B(CSTB/CST6/STFB)免疫試劑盒
扣囊復(fù)膜孢酵母親環(huán)蛋白(親環(huán))40抗體Human CCR4(C-C chemokine receptor type 4) ELISA Kit人胱抑A(CSTA/STF1/STFA)免疫試劑盒
Bacillus aryabhattai T調(diào)控相關(guān)蛋白抗體Human IKBKB(Inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase subunit beta) ELISA Kit人胱天蛋白激活的脫氧核糖核(CAD)免疫試劑盒
熱吸水鏈霉菌突觸后蛋白CRIPT抗體Human ROMO1(Reactive oxygen species modulator 1) ELISA Kit人胱天蛋白9(Casp-9)免疫試劑盒
米曲霉鈣粘附蛋白8抗體Human THRA(Thyroid hormone receptor alpha) ELISA Kit人胱天蛋白8(Casp-8)免疫試劑盒
Bacillus tequilensis6號染色體開放閱讀框174抗體Human FH(FumaRate hydRatase, mitochondrial) ELISA Kit人胱天蛋白-5(CASP5)免疫試劑盒
科氏葡萄球菌科氏亞種6號染色體開放閱讀框150抗體Human GAPDH(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase) ELISA Kit人胱天蛋白3(Casp-3)免疫試劑盒
水生哈薩克斯坦酵母X染色體開放閱讀框56抗體Human MASP1(Mannan-binding lectin serine protease 1) ELISA Kit人胱天蛋白12(Casp-12)免疫試劑盒
美味牛肝菌9號染色體開放閱讀框152抗體Human LSS(Lanosterol synthase) ELISA Kit人胱天蛋白10(CASP10)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌6號染色體開放閱讀框58抗體Human IDE(Insulin-degrading enzyme) ELISA Kit人胱天蛋白1(Casp-1)免疫試劑盒
爪哇根霉接觸蛋白相關(guān)蛋白4抗體Human IFI16(Gamma-interferon-inducible protein 16) ELISA Kit人胱硫β-合(CBS)免疫試劑盒
鏈格孢CD24抗體Human KLK7(Kallikrein-7) ELISA Kit人胍基丁脲水解/凝集(AGMAT)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌接觸蛋白相關(guān)蛋白3抗體Human FPR2(N-formyl peptide receptor 2) ELISA Kit人瓜免疫試劑盒
囊毛霉CD24抗體Human ACAN(Aggrecan core protein) ELISA Kit人骨織(Ostn)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌限局性核因子3抗體Human 12-HETE(12-Hydroxyeicosatetraenoic Acid) ELISA Kit人骨形成蛋白6(BMP-6)免疫試劑盒
紅曲霉Monascus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:AR石斛酚
草生毛霉Mucor│foenicola 質(zhì)量規(guī)格:AR甘松新
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:≥85%(HPLC)毛蘭
c-Met和ALK抑制劑(Crizotinib) 4-溴苯甲二乙基縮Ⅰ型膠原C端肽Elisa
爪哇根霉 2,6-二溴-4-氟血清白蛋白Elisa
枯草芽孢桿 苯乙基酸N-羥乙酰神經(jīng)氨酸Elisa
陳華癸氏中間根瘤 雙(二叔丁基苯基膦)二化鈀(II)胰腺癌標(biāo)志物-CA242Elisa
季也蒙有孢漢遜酵母 Boc-Lys(Z)-OSuS-亞硝基Elisa
構(gòu)巢曲霉 N-(叔丁氧羰基)-D-谷氨酸1-苯甲酯多巴-β羥化Elisa
草木樨中華根瘤 Acebutolol HClⅡ型膠原a1Elisa
雅致小克銀漢霉 (S)-叔丁基亞磺酰β-1,3-糖基轉(zhuǎn)移Elisa
分枝卷霉 帕拉金糖水合物β-1,3-糖基轉(zhuǎn)移Elisa
大腸埃希氏桿 4--3-三氟甲巨噬炎性蛋白1β Elisa
釀酒酵母 BOC-L-Α-氨基丁酸色P4503A4Elisa
灰樹花 3-氨基-2,6-二蛋白 DJ-1Elisa
東方伊薩酵母 新亞銅試劑半水合物磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD-3Elisa
短柄帚霉 3,5-二溴-4-溶體Elisa
薄蓋靈芝 3-溴-4-硫氧化還原蛋白2Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)