詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
LCL161 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
英文名稱:LCL161 產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg LCL161是一種IAP抑制劑,在HEK293細胞中,抑制XIAP活性,IC50為35nM,在MDA-MB-231細胞中,抑制cIAP1活性,IC50為0.4nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1005342-46-0 純度:99.17% 分子量:500.63 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
鮑姆針層孔菌促腎上腺皮質釋放激受體2抗體Human NPR1(Atrial natriuretic peptide receptor 1) ELISA Kit人基質金屬蛋白抑制因子3(TIMP-3)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌20號染色體開放閱讀框132抗體Human IL17B(Interleukin-17B) ELISA Kit人基質金屬蛋白抑制因子2(TIMP-2)免疫試劑盒
鼠李糖乳桿菌IV型膠原蛋白/4型膠原蛋白/膠原蛋白4抗體Human GREM1(Gremlin-1) ELISA Kit人基質金屬蛋白9/明膠B(MMP-9/Gelatinase B)免疫試劑盒
棘孢曲霉煙堿型乙酰受體B2抗體Human DNMT1(DNA(cytosine-5)-methyltransferase 1) ELISA Kit人基質金屬蛋白8/中性粒膠原(MMP-8)免疫試劑盒
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類阿達青霉親環蛋白(親環)PPIB抗體Human TERT(omerase reverse transcriptase) ELISA Kit人基質金屬蛋白5(MMP-5)免疫試劑盒
帶小棒鏈霉菌8號染色體開放閱讀框34抗體Human MRC2(C-type mannose receptor 2) ELISA Kit人基質金屬蛋白4(MMP-4)免疫試劑盒
都柏林克羅諾桿菌都柏林亞種M鈣粘附分子抗體Human RELN(Reelin) ELISA Kit人基質金屬蛋白3/基質裂解1(MMP3/STR1)免疫試劑盒
球孢白僵菌凋亡誘導蛋白NALP3抗體Human FGF8(Fibroblast growth factor 8) ELISA Kit人基質金屬蛋白25(MMP25)免疫試劑盒
Sphingomonas abaci周期B2抗體Human IFNE(Interferon epsilon) ELISA Kit人基質金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒
大腸埃希菌鈣腔蛋白Human PIP(Prolactin-inducible protein) ELISA Kit人基質金屬蛋白1原(Pro-MMP-1)免疫試劑盒
灰樹花6號染色體開放閱讀框222抗體Human GOT1L1(Putative aspartate aminotransferase, cytoplasmic 2) ELISA Kit人基質金屬蛋白14(MMP-14)免疫試劑盒
根瘤菌熱休克蛋白58抗體Human TK1(Thymidine kinase, cytosolic) ELISA Kit人基質金屬蛋白13(MMP-13)免疫試劑盒
澳大利亞糖絲菌色C P450 17A1抗體Human AIM2(Interferon-inducible protein AIM2) ELISA Kit人基質金屬蛋白12(MMP-12)免疫試劑盒
根瘤菌膜蛋白CLDND1抗體Human 5-HETE(5-Hydroxyeicosatetraenoic Acid) ELISA Kit人基質金屬蛋白10(MMP-10)免疫試劑盒
釀酒酵母二氫嘧啶相關蛋白1抗體Human FECH(Ferrochelatase, mitochondrial) ELISA Kit人基質金屬蛋白1(MMP-1)免疫試劑盒
嗜鹽堿紅菌Natronorubrum│sp. 質量規格:IND芥子堿硫鹽
里亞氏須腹菌Rhizopogon│reaii A. H.Smith 質量規格:Indicatorα-三聯噻吩
致病疫霉Phytophthora│infestans (Mont.) de Bary 質量規格:IND香荊芥酚
IAP抑制劑(LCL161)產阿拉伯糖漢遜酵母 多球殼3氧代5α類固4脫氫2Elisa
釀酒酵母 2,8-雙(三氟甲基)-4-羥基喹啉類固5α還原1Elisa
大腸埃希氏 2-溴苯甲二乙縮肌酸激同工MBElisa
戴爾根霉 4,5-二甲基噻唑鈣調神經磷酸Elisa
豇豆慢生根瘤 5-甲基噻唑中性粒趨化因子1Elisa
復輪生小克銀漢霉 2-溴-4-氟吡啶內皮特異性分子Elisa
馬鏈球馬亞種 4-叔丁基苯戊肝抗原b5Elisa
大腸埃希氏 N,N-二甲基間苯二,內源性類洋地黃因子Elisa
變幻青霉 Fmoc-beta-氨酸促性腺平抑因子Elisa
腸桿屬 7--1H-吡咯[2,3-C]吡啶抗聚角蛋白微絲蛋白抗體Elisa
枯草芽孢桿 硝酸鐿絲聚合蛋白Elisa
鉤狀木霉 Pemetrexed disodium hydrate類風濕因子抗體Elisa
假單胞 PCB No.30低糖基化IgA1Elisa
*櫻桃鏈格孢 PCB No.30半乳糖缺乏IgA1Elisa
紅硬囊果青霉 N-Z-L-Homoserine lactone球蛋白A1Elisa