公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:丙酮酸激酶M2激活劑(TEPP-46)
英文名稱:pyruvate kinase M2 activator
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
英文名稱:pyruvate kinase M2 activator 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg TEPP-46是一種有效的,選擇性的酸激酶M2(pyruvate kinase M2)的激活劑,半數(shù)激活濃度AC50值為92nM,對(duì)其他PKM1,PKL和PKR作用較小或沒(méi)有作用。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1221186-53-3 別名:ML-265 純度:99.35% 分子量:372.46 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
亞美尼亞固氮菌降鈣基因相關(guān)肽1型受體抗體Human SCAMP1(Secretory carrier-associated membrane protein 1) ELISA Kit人柯薩奇病IgA(Cox V-IgA)免疫試劑盒
戊糖乳桿菌CD19抗體Human IKBKG(NF-kappa-B essential modulator) ELISA Kit人柯薩奇病A16(CVA16)抗體(IgM)免疫試劑盒
根瘤菌磷化CD19抗體Human LMAN1(Protein ERGIC-53) ELISA Kit人柯薩奇病A16(CVA16)抗體(IgG)免疫試劑盒
土壤桿菌屬淋巴趨化因子CCL21抗體Human LPAR1(Lysophosphatidic acid receptor 1) ELISA Kit人柯薩奇病A16(CVA16)免疫試劑盒
加拿大帚霉表面趨化因子受體2A抗體Human OVOS1(Ovostatin homolog 1) ELISA Kit人柯薩奇病(Cox V)抗體(IgM)免疫試劑盒
球毛殼菌表面趨化因子受體2B抗體Human MTX1(Metaxin-1) ELISA Kit人柯薩奇病(Cox V)抗體(IgG)免疫試劑盒
茶樹(shù)菇表面趨化因子受體2抗體Human LMAN1(Protein ERGIC-53) ELISA Kit人抗組織轉(zhuǎn)谷酰(tTG)抗體(IgG)免疫試劑盒
潰瘍棒狀桿菌金屬肽鏈內(nèi)切抗體Human LPAR1(Lysophosphatidic acid receptor 1) ELISA Kit人抗組織轉(zhuǎn)谷酰(tTG)抗體(IgA)免疫試劑盒
羅磷傘鈣介質(zhì)抗體Human MTX1(Metaxin-1) ELISA Kit人抗組蛋白抗體(AHA)免疫試劑盒
赭綠青霉表面趨化因子受體6抗體Human OVOS1(Ovostatin homolog 1) ELISA Kit人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體免疫試劑盒
癤葡萄座腔菌胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子抗體Human MAOB(Amine oxidase [flavin-containing] B) ELISA Kit人抗組酰基tRNA合成,質(zhì)(HARS)抗體免疫試劑盒
馬拉交替紅色桿菌半胱蛋白蛋白-6抗體(N端)Human OPRL1(Nociceptin receptor) ELISA Kit人抗內(nèi)膜抗體(EMAb)免疫試劑盒
黃綠木霉CSMD1抗體Human IL17D(Interleukin-17D) ELISA Kit人抗滋養(yǎng)膜抗體(ATA)免疫試劑盒
德氏乳桿菌保加利亞亞種煙堿型乙酰受體α4抗體Human PKD1(Polycystin-1) ELISA Kit人抗著絲點(diǎn)抗體(ACA)免疫試劑盒
喜溫愛(ài)達(dá)荷犁頭霉表面趨化因子受體9抗體Human AXIN2(Axin-2) ELISA Kit人抗轉(zhuǎn)谷酰抗體(IgG)免疫試劑盒
異常威克漢姆酵母表面趨化因子受體5抗體Human PPP1CA(Serine/threonine-protein phosphatase PP1-alpha catalytic subunit) ELISA Kit人抗轉(zhuǎn)谷酰抗體(IgA)免疫試劑盒
鐮刀菌Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對(duì)試劑3-硝基酪試劑盒9-基
球毛殼Chaetomium│globosum 質(zhì)量規(guī)格:離子對(duì)色譜用試劑3-羥基-3-基戊二酰合1試劑盒阿馬堿
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格:離子對(duì)色譜用試劑3-葡萄糖苷孕二試劑盒阿奇霉
丙酮酸激酶M2激活劑(TEPP-46)芽孢桿 N-芐基乙二轉(zhuǎn)酮Elisa
三葉草根瘤 1-溴-4--2-5-磷酸核糖激Elisa
產(chǎn)黃青霉 O-甲基-L-蘇氨酸5-磷酸核糖激Elisa
芽孢桿屬 2-溴-5-氟吡啶G蛋白偶聯(lián)受體43Elisa
珊瑚鏈霉 3-甲酰抗Elisa
冷海水黃桿 1-甲氧基-2,3-O-異亞基-5-O -對(duì)甲苯磺酰基-beta-D-呋喃核糖苷幽門螺桿IgG抗體Elisa
弗雷德里克斯堡假單胞 鹽酸賽庚啶肌糖原Elisa
墨汁鬼傘 6-溴-2-四氫萘酮膠原吡啶并啉Elisa
新月彎孢 4--2-硝苯脫氧膠原吡啶并啉Elisa
釀酒酵母 二異基氨基鋰 溶液磷酸化叉頭框蛋白Elisa
熱帶假絲酵母 1-乙基-3-甲基咪唑鎓硫酸氫鹽肌肉特異性泛蛋白連接1Elisa
釀酒酵母 環(huán)基酸肌蛋白1Elisa
土星擬威爾酵母subsufficiens變種 4-庚基-4'-基聯(lián)苯F框蛋白32Elisa
聚生殼 4-己基聯(lián)苯肉堿脂酰轉(zhuǎn)移IIElisa
弗尼青霉 Nysted 試劑小膠質(zhì)標(biāo)志物Elisa