詳細介紹
商品介紹:
細胞中的細胞核是由酸性物質組成,它與堿性染料的親和力較強;而細胞漿則相反,它含有堿性物質和酸性染料的親和力較大。巴氏染色液利用這一特性對細胞進行多色性染色,細胞經染色后能清晰地顯示細胞的結構,胞質透亮鮮麗,各種顆粒分明,細胞核染色質非常清楚,從而較容易發現異常細胞。通過巴氏染色可反映出細胞在炎癥刺激下和癌變后的形態學變化,對早期發現和診斷一些病變和腫瘤具有較重要意義。 巴氏染色法是臨床細胞學檢查常用的傳統染色方法,在婦科檢查中,巴氏染色細胞學檢查是宮頸癌及癌前病變的較常用篩查方法。同時巴氏染色還可觀察女性激素水平和檢測生殖道病原體如念珠菌、滴蟲等的感染。其中EA50染液為EA36的改良型,其操作方法與EA36相同。一般認為,EA36和EA50較適用于婦科標本,改良EA65染液較常用于非婦科標本(如胸、腹水等脫落細胞)。 儲存條件:室溫密封保存。 有效期:六個月。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
400ml | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
花錨(標準品)英文名稱: Boron solutionG蛋白偶聯受體RTA蛋白抗體包裝5g
花旗松,二氫槲皮(標準品)英文名稱: Bismuth solutionG蛋白偶聯受體GPR155蛋白抗體包裝1g
花生紅衣(標準品)英文名稱: Copper solutionG蛋白偶聯受體GPR30蛋白抗體包裝5g
華北大黃(標準品)英文名稱: Copper solutionG蛋白偶聯受體GPR86蛋白抗體包裝500mg
華佩蘭(標準品)英文名稱: Chromium solutionG蛋白偶聯受體HM74蛋白抗體包裝25g
化橘紅(柚)(標準品)英文名稱: Chromium solution樣蛋白1樣蛋白抗體包裝5g
槐定堿(標準品)英文名稱: Chromium solution磷化接頭蛋白Gab 2抗體包裝25g
槐耳菌質(標準品)英文名稱: Cobalt standard磷化接頭蛋白Gab2抗體包裝5g
槐果堿(標準品)英文名稱: Cobalt standard干擾/維誘導凋亡相關基因抗體包裝1g
槐花(標準品)英文名稱: Dysprosium standard磷化接頭蛋白Gab 2抗體包裝250mg
槐黃英文名稱: Europium standard多肽N-乙酰基半乳糖轉移13抗體包裝100g
槐角(標準品)英文名稱: Fluoride standard銜接蛋白γ/γ1-Adaptin抗體包裝25g
槐角苷;槐屬苷(標準品)英文名稱: Fluoride standard半乳糖瓦爾登轉化抗體包裝5g
槐米(標準品)英文名稱: Gold standard半乳糖凝集10抗體包裝25g
獾油(標準品)英文名稱: Germanium standard半乳糖激2抗體包裝5g
豬鏈球菌Streptococcus│suis 質量規格:>98.5%,可用于培養熱休克蛋白糖蛋白96試劑盒α-蒎烯;α-Pinene
平滑假絲酵母Candida│parapsilosis 質量規格:>98%,USP33,可用于培養熱休克蛋白90kDaβ試劑盒蒲公英賽;Taraxerol
ATCC09027=LMG8029=CGMCC1.2421資源名稱: 銅綠假單胞菌 質量規格:HPLC>98%,標準品熱休克蛋白75 kDa,線粒體試劑盒哌異黃;Scandine
巴氏染色試劑盒(EA65)干酪乳桿 3-乙酰-2,4-二甲基-5乙氧羰基吡咯異質性胞核核糖核蛋白KElisa
少根根霉東京變種 (+)-1,4-二-O-芐基-D-蘇糖硫酸軟骨Elisa
類阿達青霉 Nα-苯甲酰-DL-精氨酰-β-萘阿立新BElisa
膠孢 DiOC2(3) [3,3'-Diethyloxacarbocyanine Iodide]晶狀體蛋白αAElisa
田菁根瘤 2-氟-3-甲基吡啶-5-酸CHO宿主蛋白Elisa
橙黃色擲孢酵母 (±)-BOC-A-膦酰基甘氨酸酯,95%鸚鵡衣原體抗體Elisa
嗜糖黃桿 二氯(2-吡啶甲酸)金克氏錐蟲抗體Elisa
皺褶假絲酵母 (S)-5-氧代四-3-氨酸芐酯β-羥基丁酸Elisa
托魯斯山鏈霉 2-Dicyclohexylphosphino-2′,4′,6′-triisopropylbiphe血管生成樣蛋白1Elisa
鏈卵屬 氯[2-(二叔丁基磷)二苯基]金谷氨酸脫羧2Elisa
腸沙門氏腸亞種波那雷恩血清型 1 - (4,4 - 二苯基-3 - 基)- 3 -鹽酸鹽卷曲螺旋結構域蛋白2Elisa
大腸埃希氏桿 2-(4-聯苯基)-5-苯基-1,3,4-噁二唑角蛋白6BElisa
熒光假單胞 2-氨基-5-溴噻唑-4-甲酸甲酯磷酸核糖焦磷酸酰基轉移Elisa
稻平臍蠕孢 單丁基三異辛酸錫相關血漿蛋白AElisa
北京擲孢酵母 2-氯-D-苯氨酸樁蛋白2Elisa