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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Apoptotic Cell Hoechst 33258 Detection Kit | 100T | 1～3天 |
商品介紹：
細胞凋亡時產生顯著的變化是染色體固縮，DNA 裂解使細胞核形態產發生變化。本試劑盒提供的熒光染料Hoechst 33258 是一種無毒、水溶性雙苯咪唑類化合物，可作為熒光探針與DNA 分子結合。 在凋亡細胞中，細胞膜對Hoechst 33258 的攝取增高，并且由于染色體高度濃縮，Hoechst 33258 與之結合增強，染色呈強藍色熒光，而正常細胞只呈微弱熒光，死細胞則不被染色，由此可檢測出凋亡。 操作方法 1. 用適當的方法誘導細胞凋亡； 2. 用冷Buffer A 洗滌細胞二次，離心收集106 細胞于1.5mL 微量離心管中；（貼壁細胞原位固定染色） 3. 加入1mL 的4%溶液(用戶自備)，4℃固定細胞10min； 4. 離心去固定液，用Buffer A 洗兩遍；離心后留50～100μL Buffer A 重懸細胞； 5. 取上步驟50～100μL 細胞懸液涂片，自然晾干； 6. 滴加100μL Hoechst 33258 工作液（備注1），室溫染色10 min，水沖凈晾干； 7. 以紫外光340nm 波長激發，熒光顯微鏡下觀察。 儲存：2-8℃，避光，有效期一年。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
川射干（標準品）英文名稱： 4-Methylumbelliferyl N-acetyl-β-D-galactosaminide磷化粘著斑激抗體包裝1g
川烏（標準品）英文名稱： 4-Nitrobenzyl alcohol磷化粘著斑激抗體包裝25g
川西獐牙菜（標準品）英文名稱： 4S Green Nucleic Acid Stain 4S Green下頜發育不良綜合征相關蛋白FAKD3抗體包裝5g
川芎（標準品）英文名稱： 5,5-Dimethyl-1,3-cyclohexanedioneFAM134B蛋白抗體包裝25g
川芎(標準品)英文名稱： 5-Fluorocytidine磷化范可尼貧血組蛋白A抗體包裝5g
川續斷皂苷VI（標準品）英文名稱： 5-Methylindole范可尼綜合征相關蛋白FANCC抗體包裝100g
川續斷皂苷乙（標準品）英文名稱： 5-NitroguaiacolFXYD離子轉運調節因子6抗體包裝25g
穿山（標準品）英文名稱： 6-Bromo-2-naphtholFyn結合蛋白抗體包裝5g
穿山龍（標準品）英文名稱： 6-Dimethylallylamino purine riboside鋅指蛋白FYCO1抗體包裝100g
（標準品）英文名稱： 6-MethylcoumarinFYTTD1蛋白抗體包裝25g
內酯（標準品）英文名稱： 7-Aminocephalosporanic acidRNA結合蛋白9抗體包裝5g
船形烏頭（標準品）英文名稱： 8-Hydroxyquinaldine巖藻糖轉移11抗體包裝1g
垂盆草（標準品）英文名稱： 9,10-Dibromoanthracene干擾誘導蛋白15抗體包裝25g
椿皮（標準品）英文名稱： 9,9-Bis(4-hydroxyphenyl) fluorineP38相互作用蛋白抗體包裝5g
慈溪麥冬皂苷A英文名稱： Acid blue 29鈣粘樣蛋白28抗體包裝1g
鮑曼不動桿菌Acinetobacter│baunannii 質量規格：進分,97%,一腎上腺髓質前體試劑盒去氫鉤藤堿;Corynoxeine
16930=LMG22726資源名稱: 羽扇豆蒼白桿菌 質量規格：UV法含量測定；一物腎上腺髓質試劑盒3-氫化去氫松苓;Dehydrotra
: ATCC9642CBS246.65CMI91855IFO6342NRRL3536資源名稱: 黑曲霉 質量規格：純度≥98%,BR腎上腺能a1A受體試劑盒羥基酪;3,4-Dihydroxyph
Hoechst33258染色試劑盒釀酒酵母 3-氨基-2,6-二酮鹽酸鹽腸道病71型IgM抗體Elisa
大腸埃希氏 對氟肉桂核轉錄因子p52Elisa
Acinetobacter toroneri 4-氟肉桂COL12A1Elisa
蠟狀芽孢桿 辛基縮水甘油布魯氏桿抗體Elisa
瓜類炭疽盤孢* 2,5-二叔丁基-1,糖化鐵蛋白Elisa
湘坪鏈霉 4-氯-3-氟抗核糖體抗體Elisa
鹽地桿 2,5-二甲氧苯PL7抗體；抗蘇氨酰tRNA合成Elisa
胡椒枯萎病 異煙酸甲酯外信號調節激Elisa
短小芽孢桿 2-吡啶甲酸甲酯γ氨基丁酸A型受體Elisa
嗜鹽噬冷 富馬酸單乙酯Ⅷ型膠原α2Elisa
薛瓦酵母 1,3-二氧雜環己烷-2-酮抗膜DNA抗體Elisa
小孢擬盤多毛孢 月桂酸鋅抗著絲點抗體Elisa
水稻節桿 2-氟-5-氯吡啶-3-甲抗α-胞襯蛋白抗體IgG；IgAElisa
膠孢 異尿酸三縮水甘油酯Abl交互子3Elisa
釀酒酵母 炔基腫瘤壞死因子受體γElisa
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