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詳細介紹
商品介紹：
熒光染料PKH67 是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料，可以標記活體細胞，通過與膜結構的脂質分子結合而標記細胞。 PKH67對細胞毒性較小，熒光背景低，脂溶性高，能夠輕易穿透細胞膜，有著強而穩定的綠色熒光。經PKH67標記的細胞可用于體外和體內增殖研究，且具有不會使鄰近細胞染色的功能。 在細胞分裂增殖過程中，PKH67 的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減，標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，因此其熒光強度是親代細胞的一半，根據這一特性，它可被用于檢測細胞增殖，細胞周期的估算及細胞分裂等方面。PKH67標記細胞的熒光非常均一，并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均一。在細胞分裂增殖過程中，PKH67標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，熒光強度變為親代細胞的一半，通過流式細胞儀根據熒光強度的不同，可檢測出未分裂細胞，分裂一次(1/2 的熒光強度)，二次(1/4 的熒光強度)，三次(1/8 的熒光強度)，以及更多分裂次數的細胞。PKH67 可檢測分裂次數多達六次甚至更多。 除了用于細胞增殖檢測，PKH67 還可以用于細胞的體外盒體內示蹤，標記后熒光在胞內表達穩定，陽性標記率達98%以上，標記細胞形態良好，能有效地觀察細胞在體外的誘導分化情況；或將標記的細胞注入體內，可以有效的顯示移植細胞在活體組織中的遷移及分化。 PKH67標記的細胞用于體內觀察可以長達數周之久，它常被用來做活體細胞檢測實驗和用熒光電鏡觀察細胞長期活動的實驗。PKH67 毒性較小，不影響細胞的增殖能力。此方法操作簡單，且不用放射性同位素，不存在安全隱患。可以更快速，更準確和更安全地得到想要的實驗數據。 PKH67標記細胞后通常用流式細胞儀進行細胞增殖檢測。 PKH67標記細胞呈綠色熒光，熒光波長：λex=490 nm,λem=502 nm。 儲存條件：-20℃避光保存。 |
產品屬性：
中文名稱：細胞膜染色試劑盒(PKH67)
英文名稱：
產品規格：500T
發貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
羅漢果皂苷Ive(標準品)英文名稱： Dimethyl sulfoxide磷化GATA結合蛋白4抗體包裝1g
羅漢果皂苷V(標準品)英文名稱： Ethylene glycolGATA結合蛋白6抗體包裝25g
羅漢果皂苷ⅡA2英文名稱： Glycerol in water for HPLC verificationGLP-1單克抗體包裝5g
羅漢果皂苷ⅢA1英文名稱： Lithium carbonate顆粒B抗體包裝25g
羅漢果皂苷Ⅲe英文名稱： Neocuproine hydrochloride monohydrateG蛋白偶聯受體30抗體包裝5g
羅漢松樹脂酚-4'-O-β-龍膽二糖苷(標準品)英文名稱： Potassium bromide神經節苷脂誘導分化相關蛋白2抗體包裝100g
羅通定/左旋延胡索乙/左旋四氫巴馬汀(標準品）英文名稱： Arsenazo I Hydrate3-磷甘油脫氫包裝25g
蘿卜硫；萊菔硫烷(標準品)英文名稱： Sodium sulfate anhydrousGDNF家族受體α-1抗體包裝5g
裸花紫珠（標準品）英文名稱： Dimethyl sulfone運動神經元存活蛋白結合蛋白1抗體包裝1g
絡塞定（標準品）英文名稱： 1,3-Propanediol葡萄糖轉運蛋白1抗體包裝100mg
絡塞琳（標準品）英文名稱： DHA葡萄糖轉運蛋白2抗體包裝10mg
絡塞維（標準品）英文名稱： Dimetridazole磷化糖皮質激受體抗體包裝100g
絡石苷（標準品）英文名稱： Penicillin V potassium saltG蛋白偶聯受體GPR158蛋白抗體包裝1g
絡石藤（標準品）英文名稱： 2-NP-AOZγ連環蛋白/Catenin γ /γ鏈接抗體包裝5g
絡緦（標準品）英文名稱： SulfacetamideG1基丁A型受體相似蛋白2抗體包裝1g
海假交替單胞菌Pseudoalteromonas│marina 質量規格：purity>99.5%,EP6,BR前顆粒蛋白試劑盒貓眼草黃;Chrysospleneti
鏈單孢菌屬菌種Streptomonospora│sp. 質量規格：HPLC>98%,標準品前膠原C內肽增強子1試劑盒木栓;Friedelin
熱帶假絲酵母Candida│tropicalis 質量規格：>98.5%,BR前膠原C端肽試劑盒白綿馬AP;Albaspidin AP
細胞膜染色試劑盒(PKH67)伴放線團聚桿 4-氯-3-三氟甲氧基苯甲心肌肌鈣蛋白CElisa
枯草芽孢桿 4-氯-3-三氟甲氧前列腺癌抗原3Elisa
膠孢 3--4-α-甲酰基消旋Elisa
堿湖迪茨氏 3-外雙環氨基[2.2.1]庚烷-2-外羧基酸晶狀體上皮源性生長因子Elisa
雜色曲霉 3-內雙環氨基[2.2.1]-5-嗯-2-內羧基酸前列腺特異性膜抗原Elisa
異配囊接霉 乙酰乙酰芐（AABA）氨肽NElisa
枯草芽孢桿 2-乙基丁酸脂酰Elisa
栗酒裂殖酵母 1-萘甲酰氯精氨酸脫亞氨Elisa
細鏈格孢 2,5-二氟-4-甲氧基苯甲粘蛋白4Elisa
柑橘青霉 1-[2-(trifluoromethyl)phenyl]propan-1-ol粘蛋白20Elisa
光帽鱗傘 3,5-二甲氧基芐溴粘蛋白16Elisa
肉桂球形孢囊 L-酪氨鹽酸鹽表皮生長因子樣蛋白6抗體Elisa
短小芽孢桿 3-溴-4,5-二氟苯唾液酸結合Ig樣凝集7Elisa
大腸桿 4′-羥基-2′-乙酮森林腦炎IGG抗體Elisa
巨獸芽孢桿 [4-(tert-butylcarbamoyl)-3-fluoro-phenyl]boronic a森林腦炎IGM抗體Elisa
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