詳細(xì)介紹
DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)系列原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)系列 | 50次 | GOY-P4037 |
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
特點(diǎn) :
本試劑盒可用于檢測食品或其他材料中是否有的成分。現(xiàn)代食品加工工藝改變了食材原有的味道、氣味、色澤、紋理和質(zhì)地等特性,因此傳統(tǒng)的感官鑒別技術(shù)已經(jīng)無法對食材的真?zhèn)芜M(jìn)行準(zhǔn)確的鑒定。同時(shí)部分食材還有致敏性,因此基于基因檢測的快速靈敏的食材來源檢測技術(shù)將對食品監(jiān)管和安全提供重要的保障。本產(chǎn)品就是為滿足這一需求根據(jù) PCR 原理開發(fā)的產(chǎn)品,它具有下列特點(diǎn):
1. 一管式操作,用戶只需要提供樣品即可。
2. 根據(jù)大豆熱休克蛋白基因保守區(qū)域設(shè)計(jì)引物,能專一性檢測出樣品中的大豆成分,但不能檢測其他非大豆成分。
3. 快速,整個(gè)檢測過程(按一個(gè)樣品計(jì))所需時(shí)間僅為 2.0 小時(shí)。
4. 只需要普通 PCR 儀和凝膠電泳儀,無需配置貴重儀器設(shè)備。
5. 對混合樣品中大豆成分的檢測下限為 0.1%,對樣品中大豆成分的核酸檢測下限為 1.0ng/μL。
6. 本只能用于科研,足夠 50 次 40uL 體系的常規(guī) PCR。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
angiotension Ⅱ receptor 1 Antibody,ATⅡR1 Ab ELISA Kit貓F(tuán)T4 elisa檢測試劑盒Coniferyl alcohol
ANGⅡR-1 ELISA Kit貓GH elisa檢測試劑盒Methyl 3,4,5-trimethoxycinnamate
angiotensin Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit貓IFN-α elisa檢測試劑盒1-(4-Hydroxyphenyl)propan-1-one
angiotensin II(2-7)ELISA Kit貓IL-12 elisa檢測試劑盒Cinnamyl cinnamate
Angiotensin Ⅰ Converting Enzyme,ACEⅠ ELISA Kit貓IL-2 elisa檢測試劑盒Syringin
angiotension I receptor Antibody,ANG-ⅠR antibody ELISA Kit貓IL-4 elisa檢測試劑盒Docosyl caffeate
angiotension Ⅰ,Ang-Ⅰ ELISA Kit貓IL-6 elisa檢測試劑盒Cinnamic acid
Angiotension 1-7,Ang1-7 ELISA Kit貓IL-6R elisa檢測試劑盒2,3-Dihydroxy-3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid
VIP ELISA Kit貓LH elisa檢測試劑盒Dihydroconiferyl alcohol
AMOT ELISA Kit貓MCP-1 elisa檢測試劑盒Coniferin
Trichinella antibody ELISA Kit貓P27 elisa檢測試劑盒3-(4-Hydroxyphenyl)-1-propanol
bromodeoxyuridine,BrdU ELISA kit貓PROG elisa檢測試劑盒3-(4-Hydroxy-3-methoxyphenyl)propyl tetracosanoate
Androstenedione,ASD ELISA Kit貓PTH elisa檢測試劑盒Octacosyl (E)-ferulate
thymus-dependent antigen,TD-Ag ELISA Kit貓T elisa檢測試劑盒β-Hydroxypropiovanillone
Thymopentin,TP-5 ELISA Kit貓T3 elisa檢測試劑盒o-Hydroxycinnamaldehyde
Thymosin β4 ELISA Kit貓T4 elisa檢測試劑盒trans-4-Hydroxycinnamic acid
DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)系列PLC gamma 2(Tyr753) 磷酸化磷酯酶Cγ2抗體規(guī)格 0.1ml
PLC gamma 2 (Tyr759) 磷酸化磷酯酶Cγ2抗體規(guī)格 0.1ml
PLC gamma 1/PLCG1(Tyr775) 磷酸化磷酯酶Cγ1抗體規(guī)格 0.1ml
PLC gamma 1(Ser1248) 磷酸化磷酯酶Cγ1抗體規(guī)格 0.1ml
PLC gamma 1 (Tyr771) 磷酸化磷酯酶Cγ1抗體規(guī)格 0.1ml
PLC beta3 (Ser537) 磷酸化磷酯酶Cβ3抗體規(guī)格 0.1ml
PLC beta3 (Ser1105) 磷酸化磷酯酶Cβ3抗體規(guī)格 0.1ml
使用方法:
注:所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1.樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。