色譜柱活化的重要性
色譜柱需要保存在相應的保存溶劑中進行保存,如因各種原因導致的色譜柱填料干涸,那使用前,就需要先用色譜柱保存溶劑進行低流速潤濕(即活化)后,才能正常使用。否則,輕則無法出正常峰,檢測工作無法進行,重則因使用不當,導致色譜柱損壞。因此,如果出現填料干涸的情況,我們需要先將色譜柱進行活化。那么,哪些情況會導致填料干涸,而需要對色譜柱進行活化呢?
哪些情況會導致填料干涸,
而需要對色譜柱進行活化?
● 新色譜柱,在儲存,運輸過程中,兩端堵頭會發生松動,從而導致保存液揮發,色譜柱兩端干涸,這種情況下,需要按說明書進行活化,一般活化時間為1-4小時(具體以說明書為準)。但色譜柱在進行前面的短時間活化后,峰型依然不正常,那就是色譜柱壞了嗎?不是的,這種情況可能是填料干涸比較嚴重,短時間的活化無法使色譜柱填料充分潤濕導致的,這種情況下,就需要延長色譜柱活化時間,一般用說明書的活化試劑,以0.2-0.3mL/min的流速進行過夜活化就可以解決了。
● 舊色譜柱就一定不需要活化嗎?不是的,對于使用過的色譜柱,如果一個月以上沒有再使用,保存液也會有損失,特別是連在儀器上沒有卸下來的色譜柱,一個星期以上就需要重新活化一下再進行使用。
色譜柱活化需要注意哪些問題?
● 對于長時間未使用的或新開封的色譜柱,一般不建議直接用檢測流速進行活化,需要先用低流速維持一段時間后,再緩慢提高流速,否則,很容易因瞬間的高流速損傷填料,使色譜柱損壞。
● 如從冰箱拿出的色譜柱,或儀器處于高溫狀態時,一定要使色譜柱回到室溫,柱溫箱先降到室溫,再連接色譜柱,否則,很容易因溫度的瞬間差異過大,導致色譜柱損傷。
● 如色譜柱是在檢測時發現峰型異常需要活化,那使用活化試劑前,一定要先用過渡流動相充分置換色譜柱內的溶劑,再用活化試劑進行活化。如反相色譜柱檢測流動相中含有鹽,那在活化前,需要先用低有機相比例的流動相將鹽wan全置換后,再用活化試劑進行活化。