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液相色譜方法開發(fā)中紫外吸收波長的選擇
選擇吸收波長一般包含（不限于）
以下幾種考慮
1、不光考慮目標(biāo)物的最大吸收波長，同時(shí)要考慮樣品干擾物吸收值最小的波長。
2、飽和烴類以及其氨基或氰基衍生物是僅有的一類wan全不適合UV檢測(cè)的有機(jī)化合物。
3、被特定基團(tuán)（-O-、-OH、-Cl、-COOH、-COOR）取代的飽和烴類具有臨界吸收值，可能需在短波長處（185-210nm）檢測(cè)。
4、除上述幾類化合物外，一般化合物都能在較長波長（>210nm）檢測(cè)。下表列出各種官能團(tuán)的最大波長與摩爾吸收系數(shù)。
一些常用官能團(tuán)的最大吸收波長與摩爾吸收系數(shù)
5、流動(dòng)相組分的紫外本底吸收。此項(xiàng)考慮涉及到溶劑的種類選擇、流動(dòng)相pH選擇以及流動(dòng)相緩沖鹽選擇等。有些酸有紫外本底，如甲酸，乙酸；有些沒有，如磷酸。這樣，在使用較低波長檢測(cè)的方法時(shí)，就要考慮使用紫外本底小的酸。冰醋酸在短波長檢測(cè)下應(yīng)該慎用。水在180nm以上實(shí)際無吸收，可忽略其影響。正相色譜所用溶劑的吸收度通常更強(qiáng)，所以一般需在長波長檢測(cè)。
反相流動(dòng)相組分的UV吸收值與波長的關(guān)系
正相溶劑的UV吸收值與波長的關(guān)系
6、最大吸收波長λmax與化學(xué)結(jié)構(gòu)的關(guān)系。紫外光譜提供了分子中生色團(tuán)和助色團(tuán)的信息，目前雖不能精確計(jì)算紫外特征吸收峰，但已總結(jié)出各種經(jīng)驗(yàn)規(guī)則。最早提出的Woodward（伍德沃德）和Fieser（費(fèi)塞爾）規(guī)則可用來估算二烯烴，多烯烴及共軛烯酮類化合物的最大紫外吸收波長。
多烯烴類與α，β－不飽和酮類紫外吸收的經(jīng)驗(yàn)規(guī)則
參考資料：
1. 實(shí)用高效液相色譜法的建立［美］L.R.森德爾 J.J.柯克蘭 J.L.格萊吉克 著．張玉奎 王杰 張維冰 譯．
2. 基礎(chǔ)有機(jī)化學(xué)（第三版）．刑其毅 裴偉偉 徐瑞秋 裴堅(jiān)．