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5ml-CCK-8細(xì)胞增殖毒性檢測試劑盒
  • 5ml-CCK-8細(xì)胞增殖毒性檢測試劑盒
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地: 上海

更新時間:2024-11-25 11:30:23

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CCK8細(xì)胞增殖毒性檢測試劑盒是一種基于WST-8而廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速、高靈敏度檢測的試劑盒。WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),其在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的甲臜formazan。活細(xì)胞的數(shù)目越多,則顏色越深。對于同樣的細(xì)胞,顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān)系。

與傳統(tǒng)的MTT 法相比CCK-8細(xì)胞增殖毒性檢測試劑盒具有明顯的優(yōu)勢:

1.MTT 法生成的甲臜不是水溶性的,需要使用DMSO 等有機(jī)溶劑溶解;而CCK-8(CCK-8細(xì)胞增殖毒性檢測試劑盒) 產(chǎn)生的甲臜是水溶性的,省去了溶解步驟,因此減少了該操作步驟帶來的實驗誤差。
2.由于CCK-8 產(chǎn)生的甲臜是水溶性的,無需吸掉培養(yǎng)基后,再用DMSO 等有機(jī)溶劑溶解,非常適合用于懸浮細(xì)胞的活性測定。
3.與MTT 方法相比,CCK-8 法線性范圍更寬,靈敏度更高。
4.CCK-8 法對細(xì)胞無毒性,可以多次測定,選取最佳測定時間。
5.CCK-8 法無需配制,即開即用。
6.CCK-8 法適合大規(guī)模、高通量的樣品檢測

使用方法

1.在96 孔板中配制100 μL 的細(xì)胞懸液。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)24 小時(在37℃,5% CO2的條件下)。
2.向培養(yǎng)板加入10 μL 的待測藥物進(jìn)行處理。
3.根據(jù)實驗需要,將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱孵育一段時間 (例如:6, 12,24 或48 小時)。
注:如果不進(jìn)行藥物處理而直接測定細(xì)胞的活性,則不需要2-3 步驟,直接從第4 步操作。
4.向每孔加入10 μL CCK-8 溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響O.D 值的讀數(shù))。
5.將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育2-4 小時。
6.用酶標(biāo)儀測定在450 nm 處的吸光度。
7.如果暫時不測定OD 值,可 以向每孔中加入10 μL 1% SDS(w/v) 溶液或者 0.1 M HCl 溶液,并蓋上培養(yǎng)板蓋子,在室溫條件下避光保存。24 小時內(nèi)吸光度不會發(fā)生變化。





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