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賽默飛離心小課堂 |如何利用超速離心法純化外泌體

2019-7-3  閱讀(3101)

細胞作為我們生命小的單位,我們有宏觀的溝通,他們自然也有微觀的溝通。而這細胞的“語言”,就是外泌體系統。

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外泌體系統的意義

簡單的來說,細胞通過分離自己的一部分膜,把自己“情話”(核酸,蛋白等)包裹成外泌體釋放出去,后融入到別的細胞里進行溝通。對于我們人類來說,破解了外泌體系統等于破解了細胞溝通的密碼,對于我們生命科學發展意義非凡。

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用超速離心法純化外泌體

研究外泌體的步,那一定是得先把這些小家伙給抓住。雖外泌體分離市場上百花齊放。 但這些分離技術都在純度上不盡人意。得到純的外泌體,揭開他們背后的故事,超速離心技術是非常好的選擇。

那么,

如何選擇合適的離心機

進行外泌體離心分離?

賽默飛世爾是科學服務領域的先鋒,旗下離心機產品一直以安全可靠與無微不至的便捷性著稱。

?Thermo Scientific Sorvall WX+系列超速離心機

的離心性能:大離心力達802,000 xg,滿足外泌體純化實驗需要

多樣的轉頭選擇可離心從1.5 mL離心管到250 mL離心瓶的各式離心容器,滿足您實驗室離心各種應用的需要,盡顯無以倫比的便捷性。

·Auto-Lock轉頭自鎖,3秒即可更換轉頭實現一機多用;Auto-ID瞬時轉頭自動識別

·第三方認證Clickseal生物安全性密封技術,防止氣溶膠產生,保護實驗人員的安全

·疲勞的Fiberlite轉頭,重量輕,硬度大,耐腐蝕,提供15年質保,終身無需減速使用

 
 

近日,麻省綜合醫院(MGH)的研究人員開發的一款新型微流體裝置。 該裝置可以利用微流控技術快速檢測血液中癌癥細胞來源的外泌體,以此作為癌癥診斷手段。

通訊作者Shannon Stott教授說,他們的設備能夠從在血液中數十億細胞外囊泡中挑選出腫瘤特異的細胞外囊泡。這將為未來癌癥診斷及監控提供新的方法。[1]

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由此看來,外泌體的應用可謂是越來越廣泛了。這一技術也符合了當今醫療的熱點“液體活檢”思想, 應用前景可謂十分的光明。關于液體活檢,它另一個簡單粗暴的名字叫“滴血驗癌”。想了解“液體活檢”的看官可以繼續關注我們的微信公眾號。我們往后會有詳細敘述。

 

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那么,超速離心技術在外泌體研究中到底是如何運用的呢?

用超速離心法純化外泌體

參考實驗流程

1.先取細胞培養液上清或體液作為樣本,低速離心300 xg,10 min,分離出細胞;留上清 2000 x g離心,10 min,去除死細胞。

2.剩下上清繼續提高離心力到10000 xg,30 min,去除細胞碎片,處理好后的上清可準備進行超速離心步驟。以100,000 xg的離心力,離心70 min,得到粗制外泌體沉淀(含有少量雜蛋白)。

3.用PBS重懸外泌體沉淀,再次100,000 xg,離心70 min,即可得到純凈的外泌體。[2]

如何選擇合適的離心機進行外泌體離心分離?

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Auto-Lock™ III 轉頭自鎖系統,3秒即可更換轉頭實現一機多用;Auto-ID瞬時轉頭自動識別

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