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目錄:上海一研生物科技有限公司>>原代細(xì)胞>>小鼠原代細(xì)胞>> 小鼠結(jié)腸成纖維細(xì)胞

小鼠結(jié)腸成纖維細(xì)胞
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參考價(jià)2600-6000/件
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

參考價(jià):¥2600 ~ ¥6000

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更新時(shí)間:2024-02-22 14:25:38瀏覽次數(shù):174評價(jià)

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5x105cells/T25或1mL凍存管
貨號 EY-XY3643 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) 生長特性 貼壁生長
細(xì)胞形態(tài) 成纖維樣細(xì)胞 英文名稱 Colon Fibroblasts Cells
種屬來源 小鼠
小鼠結(jié)腸成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:石蠟切片組織VEGF蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
細(xì)胞VEGF蛋白表達(dá)比色法定量檢測試劑盒
細(xì)胞VEGF蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒
VEGF蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒
VEGF蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

原代細(xì)胞的分離培養(yǎng):

原代培養(yǎng)即直接從有機(jī)體取下細(xì)胞、組織或器官,讓它們在體外維持與生長。原代培養(yǎng)的特點(diǎn)是細(xì)胞或組織剛離開機(jī)體,它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變,在一定程度上可反映它們在體內(nèi)的狀態(tài),表現(xiàn)出來源組織或細(xì)胞的特性, 因此用于藥物實(shí)驗(yàn),尤其是藥物對細(xì)胞活動(dòng)、結(jié)構(gòu)、代謝、有無毒性或殺傷作用等,是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。

(一)組織塊培養(yǎng)法

許多實(shí)驗(yàn)室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進(jìn)行原代培養(yǎng),因?yàn)榉椒ê唵危?xì)胞也較容易生長。尤其是培養(yǎng)心肌,有時(shí)還可觀察到心肌組織塊搏動(dòng)。細(xì)胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后, 即可進(jìn)行傳代。

1. 設(shè)備材料

培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺/無菌間、無菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。

2. 操作步驟

(1) 在無菌條件下,取待培養(yǎng)的組織適量,置入小燒杯中, 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次,去掉組織塊表面的血污。

(2)用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊。

(3)再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗, 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉,將燒杯傾斜,用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。

(4)用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml)的培養(yǎng)液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培養(yǎng)液。

(5)用彎頭吸管吸取組織小塊,均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面,吸去多余的培養(yǎng)液,各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋,做好標(biāo)記, 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。

(6) 2~4h 后,于超凈工作臺中,緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20%血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培養(yǎng)液少量,以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中。

(7)輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱, 如無特殊情況,不必觀察。1~2 周后,可觀察到細(xì)胞從組織塊邊緣長出,形成生長暈。

(9) 一般說來,若培養(yǎng)液無明顯改變, 1 周換液1 次即可。待細(xì)胞長滿整個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)表面,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。


小鼠結(jié)腸成纖維細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性:

產(chǎn)品名稱

小鼠結(jié)腸成纖維細(xì)胞

組織來源

結(jié)腸

種屬

小鼠

生長特性

貼壁生長

形態(tài)特征

成纖維樣細(xì)胞

英文名稱

Colon Fibroblasts   Cells

貨號

EY-XY3643

規(guī)格

5x105cells/T251mL凍存管

質(zhì)量檢測:纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等

產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T251mL凍存管

培養(yǎng)基:小鼠結(jié)腸成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基

培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37

換液頻率:每2-3天換液一次

消化液:0.25%

產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右

運(yùn)輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)

供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用

背景介紹:

結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸,在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部,大部分固定于腹后壁,結(jié)腸的排列酷似英文字母“M”,將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為:粘膜(上皮層,固有層,粘膜肌層),粘膜下層,肌層,外膜。






QQ截圖20240105153042.png

公司正在出售的產(chǎn)品:

信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3單克隆抗體

組織a-a-AMYLASE)活性CNPG3比色法定量檢測試劑盒

SDSDNA萃取試劑盒

10倍酵母菌SD-LEU培養(yǎng)基

載玻片細(xì)胞ER BETA 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒

通用型禽腦脊髓炎(Avian Encephalomyelitis;AE

溶酶體脂酶(酸性脂酶)活性比色法定量檢測試劑盒

動(dòng)物組織VATP酶(V type ATPase )活性比色法定量檢測試劑盒

食物總抗氧化能力(TAC)比色法(DDPH)定量檢測試劑盒

石蠟切片磷脂尼羅紅(Nile Red)直接熒光染色試劑盒

PH6-7顯色(BROMOTHYMOL BLUE)指示溶液

P21蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

檸檬酸待測樣品處理試劑盒

寡核苷酸探針非同位素化學(xué)發(fā)光法DNA斑點(diǎn)雜交試劑盒

細(xì)胞SPHK激酶總活性比色法定量檢測試劑盒(510

海洋動(dòng)物(蝦貝類)線粒體粗提分離試劑盒

整合素α5CD49e)抗體

干擾素調(diào)節(jié)因子2重組兔單克隆抗體

熱休克蛋白70相互作用蛋白抗體

Klotho多肽蛋白抗體

氧化酶蛋白7A3抗體

β-肌動(dòng)蛋白/β-Actin(內(nèi)參)單克隆抗體

酪蛋白激酶Ⅱβ亞基抗體

小鼠結(jié)腸成纖維細(xì)胞BCL10單克隆抗體


操作方法:

組織塊直接培養(yǎng)法(原代細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn))

材料與儀器

【動(dòng)物】選擇大約一半足孕時(shí)間的胚胎,10-13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細(xì)胞,成纖維細(xì)胞可從這些細(xì)胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個(gè)【實(shí)驗(yàn)材料】每組的超凈臺中有以下物品:1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶;100ml 0.25%瓶;PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個(gè);3、50ml離心筒2個(gè)4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)5、1ml,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;8、酒精燈1臺;

步驟

1) 胚胎的分離。適用哺乳動(dòng)物(倉鼠、小鼠和大鼠)2)將1-2個(gè)胚胎轉(zhuǎn)移至一個(gè)小的無菌培養(yǎng)皿中,用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎,用PBS漂洗。3)在無菌狀態(tài)下,將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25%的無菌,用攪拌棒輕輕攪動(dòng)。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動(dòng)15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降,將含有懸浮細(xì)胞的液體轉(zhuǎn)移至一無菌50ml的離心管中,該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中,重復(fù)步驟4和5。7)離心混合的細(xì)胞懸液,1200r/rain,5分鐘,棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細(xì)胞,按步驟7再次離心。9)用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞直至上清清亮為止。


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