細胞培養時為什么用5%CO2濃度?
二氧化碳培養箱:二氧化碳培養箱是通過在培養箱箱體內模擬形成一個類似細胞/組織在生物體內的生長環境,培養箱要求穩定的溫度(37°C)、穩定的CO2水平(5%)、恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對飽和濕度(95%),來對細胞/組織進行體外培養的一種裝置。為什么要用5%的CO2呢?因為細胞培養箱的中氣體環境是95%的空氣和5%的CO2。CO2既是細胞代謝產物,也是細胞所需成分,它主要與維持培養液的pH有直接關系。動物細胞多數需要微堿性環境,pH為7.2~7.4,以不超出6.8~7.6為宜。在細胞培養過程中,隨著CO2釋放量的增多,培養基會變酸,因此常加入NaHCO3(與CO2溶于水后所形成的H2CO3構成一個緩沖對)來調節pH。NaHCO3具有釋放CO2的傾向,加入CO2可以抑制這個反應的進行。培養箱中CO2濃度應與培養液中NaHCO3濃度相平衡,如果培養箱中CO2濃度設定在5%,培養液中NaHCO3的加入量應為1.97 g/L;如果CO2濃度維持在10%,則NaHCO3的加入量應為3.95 g/L。