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更新時(shí)間:2021-11-23 10:52:49瀏覽次數(shù):1220評(píng)價(jià)
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產(chǎn)品名稱:Cygnus CHO HCP宿主蛋白殘留ELISA試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):F550
產(chǎn)品規(guī)格:96T/盒
產(chǎn)品品牌:Cygnus
產(chǎn)品簡介:
CHO HCP是第三代ELISA試劑盒,比之前試劑盒具有更廣泛反應(yīng)性。新型試劑盒在檢測(cè)CHO HCPs 蛋白方面有很多改進(jìn)。新試劑盒具有更高的靈敏度,在抗體物和其它CHO表達(dá)蛋白中檢測(cè)HCP蛋白可以精確到到十億分之一百。第三代ELISA試劑盒經(jīng)過大量藥物原料和中試樣品檢測(cè)評(píng)估,是工藝開發(fā)和大量釋放試驗(yàn)檢測(cè)的通用方法。抗體反應(yīng)性使用傳統(tǒng)2D 蛋白雜交技術(shù)(2D HPLC-ELISA)鑒定。2D HPLC-ELISA方法顯示抗體對(duì)超過750種HCPs都具有反應(yīng)性。用蛋白檢測(cè)方法和ELISA正交試驗(yàn)表明這750種HCPs相當(dāng)于98%總蛋白量。因此,這種抗體可以避免丟失任何重要的HCP蛋白。產(chǎn)品使用時(shí)一定要做好保護(hù)措施:0.5M硫磺酸有強(qiáng)腐蝕性,要避免接觸眼睛、皮膚和衣物。檢測(cè)前所有試劑都要平衡到室溫。
產(chǎn)品組份:
● Anti-CHO:HRP(辣根過氧化物酶) 1x12mL F551(Product#)
● Anti-CHO微量滴定板 12x8孔 F552
● CHO HCP標(biāo)準(zhǔn)液(0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL) 1mL/瓶 F553
● Stop Solution終止液(0.5M硫磺酸) 1x12mL F006
● TMB (3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯氨) 1x12mL F005
● Wash Concentrate清洗物(20倍濃縮) 1x50mL F004
檢測(cè)原理:
CHO檢測(cè)是一個(gè)雙位點(diǎn)酶聯(lián)免疫檢測(cè)。樣本中包含的CHO HCPs蛋白與標(biāo)記有抗-CHO抗體的辣根過氧化物酶同時(shí)反應(yīng),反應(yīng)發(fā)生在之前涂有一層吸附性抗-CHO蛋白抗體的微量滴定板中進(jìn)行。免疫反構(gòu)成為夾層式結(jié)構(gòu):固相抗休-HCP-酶標(biāo)記抗體。反應(yīng)結(jié)束后清洗微量滴定板去除未結(jié)合反應(yīng)物。添加TMB作用底物反應(yīng)。微量滴定板讀數(shù)器上測(cè)定水解物濃度,水解物濃度與CHO HCPs蛋白濃度成比例。用提供的標(biāo)準(zhǔn)液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)讀數(shù)可以計(jì)算出CHO HCPs蛋白含量。
檢測(cè)過程:
取出所有試劑平衡到室溫→移取100μl anti-CHO:HRP(#F551)至每孔→分別移取50μl標(biāo)準(zhǔn)液,對(duì)照物和樣品至待測(cè)孔→密封滴定板,搖床室溫溫育2小時(shí),180rpm→清空小孔,用紙吸干殘留液,350μl清洗緩沖液清洗4次→加100μl TMB 作用物(#F005)→室溫靜置30分鐘,不需搖床→加100μl反應(yīng)終止液(#F006)→分光光度計(jì)450/650nm讀數(shù)
結(jié)果分析:
標(biāo)準(zhǔn)液(0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL)可用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,標(biāo)準(zhǔn)液濃度相當(dāng)于免疫反應(yīng)HCP總濃度。根據(jù)測(cè)定的小孔中標(biāo)準(zhǔn)液吸光值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。數(shù)據(jù)分析可以使用計(jì)算機(jī)選配曲線,例如點(diǎn)到點(diǎn),三次樣本函數(shù),或四參數(shù)邏輯曲線。不要使用線性回歸分析修改樣品吸光值,這樣會(huì)出現(xiàn)顯著誤差。也可以手工繪圖,Y軸標(biāo)注吸光值,X軸標(biāo)注濃度,然后用光滑曲線連接各點(diǎn)。然后根據(jù)樣品吸光值計(jì)算出樣品中HCP濃度。(操作時(shí)每一濃度標(biāo)準(zhǔn)液都要滴定到兩個(gè)小孔中,以便計(jì)算平均分光光度值,樣品也需計(jì)算平均吸光值)。
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產(chǎn)品名稱:Cygnus CHO HCP宿主蛋白殘留ELISA試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):F550
關(guān)于公司:
Cygnus公司專為疫苗生產(chǎn)企業(yè)、基因工程藥企、研發(fā)部門及QA部門提供宿主細(xì)胞蛋白殘留及生物工藝污染物的ELISA檢測(cè)試劑盒,諸如特殊重組表達(dá)系統(tǒng)中宿主細(xì)胞蛋白(Host Cell Protein, HCP)的殘留以及生物制品加工過程中培養(yǎng)物殘留的污染物(BioprocessContaminant, BC)。
Cygnus technologies, Inc.是美國一家專門從事生物工程和制藥過程中殘留物檢測(cè)的一系列產(chǎn)品。生物制品生產(chǎn)過程中存在許多影響產(chǎn)品質(zhì)量的殘留物,諸如特殊重組表達(dá)系統(tǒng)中宿主細(xì)胞蛋白( Host Cell protein, HCP )的殘留以及生物制品加工過程中培養(yǎng)物殘留的污染物。公司提供了廣泛而靈敏度*的一系列用于檢測(cè)生物工程殘留物的產(chǎn)品。共有39種Elisa 檢測(cè)試劑盒,包括原核、真核表達(dá)細(xì)胞宿主蛋白檢測(cè)試劑盒,細(xì)胞培養(yǎng)殘留物檢測(cè)試劑盒等
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