目錄:上海華雅思創(chuàng)生物科技有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>DC-CIK治療細(xì)胞治療>> Cygnus_F550 CHO HCP ELISA Kit CHO宿主細(xì)胞蛋白免疫檢測試劑盒
產(chǎn)品英文名稱:CHO HCP ELISA kit, 3G
產(chǎn)品中文名稱:CHO HCP酶聯(lián)免疫分析試劑盒
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CHO HCP ELISA 試劑盒 產(chǎn)品介紹:
CHO HCP是第三代ELISA試劑盒,比之前試劑盒具有更廣泛HCP反應(yīng)性。新型試劑盒在檢測CHO HCPs 蛋白方面有很多改進。新試劑盒具有更高的靈敏度,在抗體物和其它CHO表達蛋白中檢測HCP蛋白可以精確到到十億分之一百。第三代ELISA試劑盒經(jīng)過大 量藥物原料和中試樣品檢測評估,是工藝開發(fā)和大量釋放試驗檢測的通用方法。抗體反應(yīng)性使用傳統(tǒng)2D 蛋白雜交技術(shù)(2D HPLC-ELISA)鑒定。2D HPLC-ELISA方法顯示抗體對超過750種HCPs都具有反應(yīng)性。用蛋白檢測方法和ELISA正交試驗表明這些多達750種的宿主細(xì)胞蛋白意味著高 于98%的蛋白種類均可用ELISA方法檢測到。因此,這種抗體可以避免丟失任何重要的HCP蛋白。
產(chǎn)品使用時一定要做好保護措施:0.5M硫磺酸有強腐蝕性,要避免接觸眼睛、皮膚和衣物。檢測前所有試劑都要平衡到室溫。
§檢測原理:CHO檢測 是一個雙位點酶聯(lián)免疫檢測。樣本中包含的CHO HCPs蛋白與標(biāo)記有抗-CHO抗體的辣根過氧化物酶同時反應(yīng),反應(yīng)發(fā)生在之前涂有一層吸附性抗-CHO蛋白抗體的微量滴定板中進行。免疫反應(yīng)構(gòu)成為夾層 式結(jié)構(gòu):固相抗休-HCP-酶標(biāo)記抗體。反應(yīng)結(jié)束后清洗微量滴定板去除未結(jié)合反應(yīng)物。添加TMB作用底物反應(yīng)。微量滴定板讀數(shù)器上測定水解物濃度,水解物 濃度與CHO HCPs蛋白濃度成比例。用提供的標(biāo)準(zhǔn)液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)讀數(shù)可以計算出CHO HCPs蛋白含量。
§檢測過程:取出所有試 劑平衡到室溫→移取100µl anti-CHO:HRP(#F551)至每孔→分別移取50µl標(biāo)準(zhǔn)液,對照物和樣品至待測孔→密封滴定板,搖床室溫溫育2小時,180rpm→清空小 孔,用紙吸干殘留液,350µl清洗緩沖液清洗4次→加100µl TMB 作用物(#F005)→室溫靜置30分鐘,不需搖床→加100µl反應(yīng)終止液(#F006)→分光光度計450/650nm讀數(shù)
§結(jié)果分析:標(biāo)準(zhǔn)液(0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL)可用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,標(biāo)準(zhǔn)液濃度相當(dāng)于免疫反應(yīng)HCP總濃度。根據(jù)測定的小孔中標(biāo)準(zhǔn)液吸光值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。數(shù)據(jù)分析可以使用計算機選配曲線,例如點到點,三次樣本函數(shù),或四參數(shù)邏輯曲線。不要使用線性回歸分析修改樣品吸光值,這樣會出現(xiàn)顯著誤差。也可以手工繪圖,Y軸標(biāo)注吸光值,X軸標(biāo)注濃度。然后根據(jù)樣品吸光值計算出樣品中HCP濃度。(操作時每一濃度標(biāo)準(zhǔn)液都要重復(fù)滴定到兩個小孔中,以便計算平均分光光度值,樣品也需計算平均吸光值)。
CHO HCP ELISA組成成份:
● Anti-CHO:HRP(辣根過氧化物酶) 1x12mL F551(Product#)
● Anti-CHO微量滴定板 12x8孔 F552
● CHO HCP標(biāo)準(zhǔn)液(0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL) 1mL/瓶 F553
● Stop Solution終止液(0.5M硫磺酸) 1x12mL F006
● TMB (3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯氨) 1x12mL F005
● Wash Concentrate清洗物(20倍濃縮) 1x50mL F004
需自備物:
? 微量板分光光度計,雙波長450 & 650nm
? 移液器-50L and 100L
? 可重復(fù)使用或多通道移液器-100L
? 微量板搖床(150 - 200 rpm)
? 樣品稀釋液(*使用Cat # I028)
? 1L清洗瓶
? 蒸餾水
2015年統(tǒng)統(tǒng)*,--一切活動盡在上海華雅思創(chuàng)!
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