目錄:上海華雅思創生物科技有限公司>>細胞培養>>DC-CIK治療細胞治療>> Cygnus_F500 Vero Cell ELISA Kit Vero細胞宿主蛋白免疫檢測試劑盒
產品英文名稱：Vero Cell HCP ELISA kit
產品中文名稱：Vero 細胞宿主蛋白免疫檢測試劑盒
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Vero Cell HCP ELISA kit產品介紹：
病毒疫苗或其它治療用蛋白在Vero細胞中表達是商業用大量生產藥物原料產品的經濟簡便方法。Vero Cell HCP ELISA試劑盒開發使用了不同終端產品和中試樣品，４種不同疫苗產品是從疫苗生產商獲得，包括全病毒疫苗和重組蛋白。Vero Cell HCP ELISA使用具有廣泛反應性，強吸附性的多克隆抗體，可以鑒定出所有Vero細胞系中高度保守的HCP。產品靈敏性強（zui低檢測濃度達 0.7ng/mL）和具有高度特異性，可以應用于任何在Vero細胞中表達的蛋白產物。
§檢測原理：Vero Cell檢測是一個雙位點酶聯免疫檢測。樣本中包含的Vero Cell HCPs蛋白與標記有抗- Vero Cell抗體的辣根過氧化物酶同時反應，反應發生在之前涂有一層吸附性抗- Vero Cell蛋白抗體的微量滴定板中進行。免疫反構成為夾層式結構：固相抗休-HCP-酶標記抗體。反應結束后清洗微量滴定板去除未結合反應物。添加TMB作 用底物反應。微量滴定板讀數器上測定水解物濃度，水解物濃度與Vero Cell HCPs蛋白濃度成比例。用提供的標準液繪制標準曲線，根據讀數可以計算出Vero Cell HCPs蛋白含量。
§檢測過程：取出所有試 劑平衡到室溫→分別移取50µl標準液，對照物和樣品至待測孔→移取100µl anti- Vero Cell:HRP(#F501)至每孔→密封滴定板，搖床室溫溫育2小時，180rpm→清空小孔，用紙吸干殘留液，350µl清洗緩沖液清洗4次→加 100µl TMB 作用物(#F005)→室溫靜置30分鐘，不需搖床→加100µl反應終止液(#F006)→分光光度計450/650nm讀數
§結果分析：標準液(0, 2, 8, 25, 75, 200ng/mL)可用于制作標準曲線，標準液濃度相當于免疫反應HCP總濃度。根據測定的小孔中標準液吸光值繪制標準曲線。數據分析可以使用計算機選配曲線，例如點到點，三次樣本函數，或四參數邏輯曲線。不要使用線性回歸分析修改樣品吸光值，這樣會出現顯著誤差。也可以手工繪圖，Y軸標注吸光值，X軸標注濃度。然后根據樣品吸光值計算出樣品中HCP濃度。（操作時每一濃度標準液都要滴定到兩個小孔中，以便計算平均分光光度值，樣品也需計算平均吸光值）。
Vero Cell HCP ELISA組成成份：
● Anti- Vero Cell:HRP(辣根過氧化物酶標記) 1x12mL F501(Product#)
● Anti- Vero Cell coated微量滴定板 12x8孔 F502
● Vero Cell HCP標準液(0, 2, 8, 25, 75, 200ng/mL) 1mL/瓶 F503
● Stop Solution終止液(0.5N硫磺酸) 1x12mL F006
● TMB (3,3’,5,5’-四甲基聯苯氨) 1x12mL F005
● Wash Concentrate清洗物(20倍濃縮) 1x50mL F004
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