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苯基瓊脂糖凝膠
英文名稱:Phenyl-Berpharose FF
貨號:B2813
規格:1ml
1. 產品介紹
苯基-瓊脂糖凝膠FF是一種將苯基鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的較強疏水性疏水層析分離介質。該產品保留了瓊脂糖極-好的親水性及大網架結構,與生物活性大分子有很好的相容性,具有載量高、非特異性吸附少、流速快等特點,廣泛用于具有一定疏水性能的蛋白質、多肽等生物大分子的實驗室規模制備和生物制藥、生物工程的工業化制備,例如:重組人粒巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)、粒細胞集落刺激因子(G-CSF)、人集落刺激因子(M-CSF)、表皮生成因子(EGF)的生產以及單克隆抗體的純化。
2.規格
1ml(預裝柱)、5ml(預裝柱)、10ml(預裝柱)、20ml、100ml、500ml 使用方法
①平衡
用2~5個柱體積的初始緩沖溶液進行平衡,建議流速為100 cm/h。
觀察檢測器的變化,直到電導率、pH值等參數不變。
②上樣
樣品的預處理:樣品需用0.45μm濾膜過濾,在上樣,以免堵塞層析柱。
上樣量根據樣品的性質和層析介質的量進行選擇,也可通過線性實驗找到最佳上樣量。
③淋洗
用2~3個柱體積的平衡緩沖液進行淋洗,觀察檢測器的變化,直到電導率、pH值等參數基本不變。
④洗脫
疏水層析柱的洗脫可用恒定洗脫、梯度洗脫或者階躍洗脫。
一般推薦使用降低鹽濃度的梯度洗脫,亦可根據實際情況添加有機溶劑進行洗脫。
5.再生、清洗、保存
①凝膠再生
(1)用蒸餾水按操作流速沖洗3~5個柱體積,接著用平衡液清洗3~5個柱體積。
(2)再生時若有失活蛋白質或脂類物質洗不掉,可用在位清洗法除去。
②在位清洗
(1)去除強結合的蛋白質或脂類物質:1 M NaOH洗2個柱體積,8 M尿素洗2個柱體積, 30%異丙醇洗2個柱體積,平衡緩沖液洗2個柱體積。
(2)去除內毒素熱原:1 M NaOH清洗1~2 h,速度50 cm/h。
(3)在位清洗可有效去除介質上的雜質,反向清洗效果更佳
6.注意事項:
1)使用時保證柱子和緩沖液的溫度一致,避免柱床內產生氣泡,影響純化效果。
2)在常用水相緩沖液、1M NaOH、8M尿素、6M鹽酸胍、70%乙醇中穩定
3)本產品保存條件為20%乙醇,4~8℃。
4)2-25℃,常壓,避光運輸
苯基瓊脂糖凝膠
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