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促腎上腺皮質激素放免試劑盒說明書
ACTH RIA KIT
ACTH 是由垂體前葉細胞分泌的39 個氨基酸組成的直鏈多肽,分子量4500,在循環中的半
衰期僅為10~25min。ACTH 的生理作用為促進腎上腺皮質增生、合成和分泌皮質類固醇,同時
也促進腎上腺素、生長激素合成。ACTH 的合成和分泌受下丘腦促腎上腺皮質激素釋放激素
(CRH)、腎上腺皮質激素以及加壓素的調節。我們利用ACTH18~39 片段的特異抗體,建立
了特異、靈敏的測定血清、體液中ACTH 18~39 片段的放射免疫分析方法。該抗體也能同組織、
細胞切片中特異的ACTH 和體外純化的ACTH 特異結合,用于研究組織化學診斷ACTH 水平變
化。因此該方法適用于腎上腺皮質功能亢進、異位ACTH 綜合癥、腎上腺腺瘤和腎上腺皮質功
能減退等諸多研究疾病時,血清ACTH 水平的監測。
藥盒組成:
1、ACTH 標記一瓶。
2、ATCH 抗體一瓶。
3、緩沖液一瓶。
4、分離劑(第二抗體)一瓶。
5、ATCH 標準品6 瓶:0、5、15、45 、135、405pg/ml。
標本采集:取靜脈血2ml 注入含10%EDTA.Na2 30ul 和抑肽酶20ul 的試管中,混勻4℃,
3000rpm/ min 離心10min,分離血漿(溶血樣品影響測定結果)。如需要可分裝2-3 份保存,
放-20℃可保存2 個月。在-70℃可保存半年。測定前,使樣本置于室溫或冷水中復融,再次4℃,
3000rpm/ min 離心5min,取上清測定
測定方法:
ACTH RIA 操作程序單位:ul
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試劑T NSB S0 S1~ S6 樣品
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緩沖液—— 200 —— —— ——
零準品—— —— 100 —— ——
標準品—— —— —— 100 ——
樣品—— —— —— —— 100
抗體—— —— 100 100 100
125I-ACTH 100 100 100 100 100
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混勻,4℃ 保溫16~24 小時
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分離劑—— 500 500 500 500
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混勻,靜置15 分鐘,3500 轉/分離心20 分鐘,去上清,測沉淀CPM。
結果計算:
以N/T、B/T 計算NSB、S0 結合百分率,以B/B0 計算標準及待測物結合百分率,在
半對數座標紙上繪制標準曲線,并查出樣品值或由自動Υ-計數儀器直接讀出結果。
注意事項:
本月標準品每瓶用ml 緩沖液稀釋
本月藥盒抗體每瓶用ml 緩沖液稀釋
本月藥盒標記每瓶用ml 緩沖液稀釋
本試劑盒主要技術參數:
測定范圍:5~405pg/ml
靈敏度:<5pg/ml。
精密度:批內CV<4.1%,批間CV<8.4%
準確度:回收率97~104%,平均回收率96.5。
正常參考值:
1、測定本所工作組人員20 例(21~45)早8:00 血漿中ACTH 濃度為7.9~32.1pg/ml;
均值17.3±5.73pg/ml;下午16:00 血漿中ACTH 濃度為10.7~30.5pg/ml,均值18.4
±5.6pg/ml。
2、測定門診查體人群202 例(14~76 歲),早晨空腹血清中ACTH 濃度為
5.08~32.86pg/ml,均值為14.52~6.22pg/ml。
注意事項
1、緩沖液和免疫分離劑使用前必須搖勻,不可冰凍保存。
2、標記品請在使用前溶解和配制。
3、用戶如遇特殊情況,收到藥盒后不能在有效期內使用,除標記品外,其他全部
試劑存在4℃,待下次臨用前預購一瓶標記品即可。
本月藥盒參考數據:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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