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參考價(jià): | ¥ 645 |
訂貨量: | 1臺(tái) |
- 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù):531更新時(shí)間:2023-02-16 14:20:36
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- www.yeasen.com
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 500U |
---|---|---|---|
貨號(hào) | 10611ES76 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
UCF.ME® Deoxyribonuclease I (DNase I) GMP-grade | 10611ES76 | 500 U | 645 |
10611ES84 | 2000 U | 1965 | |
10611ES92 | 10000 U | 6455 |
產(chǎn)品描述
Deoxyribonuclease I (DNase I) 脫氧核糖核酸酶I是一種核酸內(nèi)切酶,可消化單鏈及雙鏈DNA產(chǎn)生單脫氧核苷酸或單鏈或雙鏈的寡脫氧核苷酸。它可使磷酸二酯鍵發(fā)生水解從而產(chǎn)生含有5'-磷酸基團(tuán)和3'-OH基團(tuán)的單脫氧核苷酸和寡脫氧核苷酸,平均消化產(chǎn)物最小為多聚四核苷酸。DNase I可催化多種形式DNA,如單鏈DNA、雙鏈DNA,甚至染色質(zhì)(其切割速率受組蛋白影響)。最佳的工作pH范圍是7-8,DNase I的活性依賴于Ca2+,并可被二價(jià)金屬離子如Co2+,Mn2+,Zn2+等激活。5 mM Ca2+可保護(hù)酶使其不被水解。在Mg2+存在下,該酶可隨機(jī)識(shí)別和切斷DNA任一條鏈上的任意位點(diǎn);而在Mn2+存在的條件下,可同時(shí)識(shí)別DNA的兩條鏈并在幾乎相同的位點(diǎn)進(jìn)行切割形成平末端,或1-2個(gè)核苷酸突出的粘末端。DNase I廣泛應(yīng)用于不含DNA的RNA制備;去除體外轉(zhuǎn)錄之后的模板DNA;在RT-PCR及RT-qPCR反應(yīng)前制備不含DNA的RNA;結(jié)合DNA聚合酶I通過(guò)切口移位進(jìn)行DNA標(biāo)記;DNA片段化文庫(kù)構(gòu)建。
本品是按照 GMP 工藝要求生產(chǎn),產(chǎn)品以無(wú)菌液體形式提供。
產(chǎn)品性質(zhì)
來(lái)源 | 重組E. coli |
最適溫度 | 37℃ |
蛋白純度 | ≥95% |
RNA酶殘留 | 10 U未檢出(陰性) |
宿主蛋白殘留 | <50 ppm |
細(xì)胞內(nèi)毒素 | <0.05 EU/30 U |
儲(chǔ)存緩沖液 | 10 mM Tris-HCl pH 7.6,2 mM CaCl2,50%甘油 |
活性單位定義 | 37℃、10 min內(nèi)使1 μg的質(zhì)粒DNA*降解所需要的酶量。 |
【注】:具體產(chǎn)品質(zhì)檢數(shù)據(jù)及更多指標(biāo)請(qǐng)查看批次質(zhì)檢報(bào)告。
產(chǎn)品組分
組分編號(hào) | 組分名稱 | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | ||
10611ES76 (500 U) | 10611ES84 (2000 U) | 10611ES92(10000 U) | ||
10611 | Deoxyribonuclease I (DNase I) | 250 μL | 1 mL | 5 mL |
運(yùn)輸和保存方法
干冰運(yùn)輸。-20℃保存,有效期一年。推薦分裝保存,避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)
1、酶使用時(shí)宜存放在冰盒內(nèi)或冰浴上,使用完畢后宜立即放置于-20℃保存。
2、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
應(yīng)用實(shí)例
反應(yīng)體系:使用RNase-free離心管及槍頭配制如下反應(yīng)體系:
組分 | 體積(μL) |
10×DNase I Buffer | 1 μL |
DNase I | 1 μL |
RNA | X |
RNase-free ddH2O | Up to 10 μL |
【注】:10×DNase I Buffer配方為10 mM Tris-HCl, 2.5 mM MgCl2,0.5 mM CaCl2, pH7.6@25℃。
反應(yīng)條件:37℃,15-30 min后,加入終濃度2.5mM EDTA溶液混勻后65℃ 10 min。處理后的模板可用于后續(xù)RT-PCR等反應(yīng)。
DNase I失活或抑制:加入EDTA至終濃度為2.5 mM后,65℃加熱10 min可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金屬離子螯合劑,達(dá)到毫摩爾/升濃度的鋅離子,0.1%的SDS,DTT、巰基乙醇等還原劑,50-100 mM以上鹽濃度均對(duì)DNase I有顯著抑制作用。
HB220325