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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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產品簡介
| 供貨周期 | 一周 | 應用領域 | 生物產業 |
|---|
產品介紹
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jetOPTIMUS® in vitro DNA transfection reagent
jetOPTIMUS® DNA體外轉染試劑
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格（元） |
jetOPTIMUS® in vitro DNA transfection reagent jetOPTIMUS® DNA體外轉染試劑 | 117-01 | 0.1 mL | 835.00 |
117-15 | 1.5 mL | 6855.00 |
產品描述
jetOPTIMUS®是Polyplus公司生產的一款///佳的DNA轉染試劑，具有陽離子納米結構，針對難轉染的細胞系，包括原代細胞、干細胞、巨噬細胞等都有很高的轉染效率。jetOPTIMUS®通過增加細胞攝取DNA的量，實現了原代細胞、干細胞較高的轉染效率。實驗結果發現，在一定的生理條件下，只需要少的DNA和轉染試劑用量，都可以實現高的轉染水平，且細胞毒性小，保持了細胞的活力狀態。
按照標準方案，1.5 mL jetOPTIMUS®轉染試劑足以在24孔板中進行750次轉染 (DNA：試劑比例=1:1）。除此之外，也可根據轉染的細胞系、核酸種類、轉染時間等，登錄Polyplus公司的網///址，搜索該產品引文數據庫。Polyplus數據庫提供了400多種的轉染條件數據，Polyplus：w/w/w.polyplus transfection.c/o/m.
產品組分
組分 | 產品編號/規格 | ||
117-01 | 117-07 | 117-15 | |
jetOPTIMUS® Reagent | 0.1 mL | 0.75 mL | 1.5 mL |
jetOPTIMUS® Buffer | 10 mL | 2×60 mL | 4×60 mL |
運輸與保存方法
冰袋（wet ice）運輸。產品4 ºC保存，一年有效。不可冷凍！
注意事項
1）該轉染試劑可以滿足多質粒共轉染，共轉染時，每孔/板的總DNA量不應超過表2所示DNA的數量。且每個質粒的量不少于10%的DNA總量。
2）制備復合物時，一定要用試劑盒里的jetOPTIMUS® 緩沖溶液稀釋DNA。禁止使用無血清培養基稀釋DNA。
3）若穩定轉染基于質粒的CRISPR/Cas9基因組編輯，建議聯系polyplus的科學支持團隊：support@polyplus-transferion.c/o/m。
4）jetOPTIMUS®轉染試劑應該在4 ºC保存，要注意避免多次反復長時間開蓋，否則可能會導致轉染試劑揮發，降低轉染效率。
5）轉染前一天，確保接種貼壁細胞密度在60%-80%，對于一些小細胞和生長緩慢的細胞，接種密度可適當擴大2倍。
6）該產品只適合體外轉染，不能用于體內轉染。
操作流程（以24孔板和轉染0.5 μg的DNA為例）
1.接種細胞
為了保證jetOPTIMUS®轉染試劑達到///佳轉染效率，建議轉染時細胞密度建議60%-80%左右。通常在24孔板，每孔5萬個貼壁細胞接種在500 µL*生長培養基中，培養24小時后進行轉染。其他培養板細胞數量請參考表1
表1轉染前一天，接種的細胞數量參考值
培養皿 | 每孔的表面積 (cm²) | 每孔接種細胞的數量 | 生長培養基體積（mL） |
96孔板 | 0.3 | 7.5×103 ~2.5×104 | 0.125 |
24孔板 | 1.9 | 4×104 ~ 1×105 | 0.5 |
6孔板 | 9.4 | 1.5 ×105~ 4×105 | 2 |
25cm2培養瓶 | 25 ~ 28 | 2 ×105~ 8.5×105 | 5 |
75cm2培養瓶 | 75 ~ 78.5 | 1×106 ~ 4×106 | 10 |
2.加入轉染試劑（轉染試劑、DNA用量與培養皿大小有關系，請參考表2）
表2根據培養皿的大小，轉染試劑、DNA用量參考值
培養皿 | jetOPTIMUS®緩沖溶液的體積（µL） | 每孔DNA的含量（μg） | jetOPTIMUS®轉染試劑體積（µL） | 培養基體積 (mL) |
96孔板 | 12.5 | 0.13 | 0.13 ~ 0.19 | 0.125 |
24孔板 | 50 | 0.5 | 0.5 ~ 0.75 | 0.5 |
6孔板 | 200 | 2 | 2~ 3 | 2 |
25 cm2培養瓶 | 500 | 4 | 4 ~ 6 | 5 |
75 cm2培養瓶 | 1000 | 10 | 10 ~ 15 | 10 |
【注】：除此之外，客戶也可以根據自身條件需求，調整轉染試劑的體積/DNA的濃度。我們建議測試DNA:jetOPTIMUS®試劑比值=1:1~1:1.5（µgDNA:µlRepeagent），具體條件和優化指南請參考表3
表3 轉染當天，根據培養皿的大小的優化指南
培養皿 | jetOPTIMUS®緩沖溶液的體積（µL） | 每孔DNA的含量（μg） | jetOPTIMUS®轉染試劑體積（µL） | 培養基體積 (mL) |
96孔板 | 12.5 | 0.10~ 0.20 | 0.10 ~ 0.30 | 0.125 |
24孔板 | 50 | 0.25 ~ 0.75 | 0.25 ~ 1 | 0.5 |
6孔板 | 200 | 1 ~ 3 | 1 ~ 4.5 | 2 |
25 cm2培養瓶 | 500 | 2 ~ 6 | 2 ~ 9 | 5 |
75 cm2培養瓶 | 1000 | 5 ~ 15 | 5 ~ 22 | 10 |
在我們的細胞轉染數據庫中可以找到許多細胞類型的具體條件，如下：w/w/w.polyplus-transferion.c/o/m/resources/cell transferion database/。
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