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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 貨號 | 20614ES76 |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 生物產業 |
產品介紹
Human DiI-Low Density Lipoprotein （Human DiI-LDL）
紅色熒光標記人源低密度脂蛋白
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 保存 | 價格（元） |
Human DiI-Low Density Lipoprotein （Human DiI-LDL） 紅色熒光標記人源低密度脂蛋白 | 20614ES76 | 500µg | 4ºC避光 | 2255.00 |
產品描述
低密度脂蛋白（Low Density Lipoprotein，簡稱為LDL）是通過脂蛋白酯酶的水解作用，脫去極低密度脂蛋白（VLDL）中的甘油三脂，釋放游離脂肪酸轉化而來的。因甘油三酯的去除使得膽固醇所占比例提高，增加顆粒本身密度，從而得到LDL。LDL與脊椎細胞表面的受體特異性結合，然后通過受體介導的內吞作用將膽固醇運輸到全身各處細胞。因此，LDL可以用來研究受體介導的內吞作用過程，尤其是在動脈粥樣硬化等疾病中，血漿來源的LDL還可用于研究LDL在功能和代謝中的氧化作用。
紅色熒光標記人源低密度脂蛋白（Human DiI-LDL）是標記熒光探針Dil（1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'- tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate）的LDL，可以用來觀察培養細胞的LDL結合位點，或篩選LDL受體表達缺陷型細胞突變株。也可以通過流式細胞術評估細胞受體水平，或檢測組織內的受體水平。 DiI-LDL是研究細胞內吞作用非常好的標記物。
翊圣提供的Human DiI-LDL為無菌包裝，可以直接稀釋使用。除提供DiI-LDL，我們還提供不帶標記的LDL，以及修飾化的LDL如乙酰化LDL（Ac-LDL），以及氧化修飾的LDL（Ox-LDL）。
制備方法
純化的人健康血漿來源的LDL直接標記上DiI熒光探針，然后通過超速離心以及透析的方法純化回收標記產物，并濾膜過濾除菌。純化的DiI-LDL溶于含0.02 mM EDTA的PBS，pH 7.4中。
產品性質
濃度（Concentration） | 0.8-3.0 mg/ml |
外觀（Appearance） | 乳狀液體 |
吸光度比例（Absorbance Ratio） | Dil/Protein=555nm/275nm=1.30 |
緩沖液組分（Buffer Components） | 0.02 mM EDTA in PBS, pH 7.4 |
運輸與保存方法
冰袋運輸；
4ºC無菌避光，收到貨后可穩定保存6周。千萬不可凍存！使用時一定要無菌操作！
注意事項
1）本品的稀釋工作液極不穩定，建議即配即用；
2）長期貯存可能會有沉淀析出，屬于正常現象，低速離心2 min去除沉淀即可使用；
3）LDL與LDL受體的結合需要Ca2+和Mn2+的參與，過量EDTA的存在會抑制其結合；
4）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操
操作步驟
1）工作液制備：無菌條件下，將DiI-LDL用細胞培養基稀釋至20-40 µg/ml。
2）細胞準備：吸除培養板內培養基，向活細胞內加入上述LDL，37℃培養4-5小時。
3）孵育結束，吸去含有Human DiI-Ox-LDL的培養基，并用無探針的培養基洗幾次。
4）根據實驗需求用熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測。
a）熒光顯微鏡觀察
采用標準的羅丹明激發：發射濾光片（或建議使用波長為：Ex/Em=549nm/565nm）；若需要請使用含3%甲醛的PBS進行固定，切勿使用甲醇或丙酮固定，因Dil易溶于有機溶劑。注需設陽性細胞以做對照。
b）細胞分選（流式細胞術）
胰蛋白酶處理細胞或者加入EDTA制成單細胞懸液，選用合適的已標記純化細胞用作陰性和陽性對照，從而進行流式分選設門（gate）。（建議使用波長為Ex: 488/514/549nm; Em: 565nm）。
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HB200423
