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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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產品簡介
產品介紹
Protein Silver Stain Kit 蛋白質銀染試劑盒
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 儲存 | 價格（元） |
Protein Silver Stain Kit 蛋白質銀染試劑盒 | 36224ES20 | 20 T | 4℃ | 470.00 |
產品描述
生化實驗中蛋白質常通過凝膠電泳的方式分離后需經過染色才能肉眼可見，染色方法有兩種：1）染料染色法；2）金屬染色法。前者主要是考馬斯亮藍染色法，后者主要采用銀染法。前者操比較簡單，省時；但是后者具有較高的檢測靈敏性，可檢測到10-100 ng蛋白質，比考馬斯亮藍染色法靈敏100多倍。本試劑盒可用于聚丙烯酰胺凝膠和瓊脂糖凝膠中的微量蛋白質的檢測。
產品組分
編號 | 組分 | 產品編號/規格 |
36224ES20（20T） | ||
36224-A | 顯影底物液（20×） | 1× 100ml |
36224-B | 敏化底物液（5×） | 3× 90ml |
36224-C | 銀溶液（10×） | 1× 20ml |
36224-D | 溶液I （5×） | 1× 16ml |
36224-E | 溶液II | 1× 10ml |
36224-F | 溶液III | 1× 2ml |
36224-G | 終止液（10×） | 2× 100ml |
運輸和保存方法
冰袋運輸。
4℃保存，1年有效。銀溶液和溶液II需要避光保存。
使用方法
以10cm2凝膠為例，不同凝膠大小可按比例調整氧化液、染色液和脫色液的體積。
所有濃縮液使用前用去離子水稀釋至1×工作液后使用，水平搖床的轉速設置在55rpm左右。
- 固定：按體積比，冰醋酸：無水乙醇：去離子水=1：4：5配制100ml固定液，將電泳后的凝膠放入固定液中，室溫條件置于水平搖床上，緩慢震蕩固定120min；
- 洗滌：用去離子水漂洗30min，期間更換3~5次。
- 增敏：用去離子水分別稀釋5×敏化底物液，以及5×溶液I至1×工作液。取65.5ml 1×敏化底物液加入4ml 1×溶液I、500μl 溶液II、30ml 無水乙醇混勻即得到增敏液。然后將凝膠放入100ml增敏液中，室溫條件置于搖床上搖動60min；
- 洗滌：用用去離子水漂洗30min，期間更換3~5次。
- 銀染：用去離子水稀釋10×銀（Ag）溶液至1×工作液。取10ml 1×銀溶液加入40μl 溶液III，加入去離子水補足體積至100ml即得到銀染液。然后將凝膠放入100ml銀染液中，室溫條件置于搖床上搖動60min；
- 洗滌：用去離子水漂洗銀染后的凝膠4次，每次1min；
- 顯色：用去離子水稀釋10×顯影底物液至1X工作液。取40ml 1X 顯影底物液加入40μl 溶液III、3μl 1×溶液I，加入去離子水補足體積至100ml即得到顯色液。然后將凝膠放入100ml顯色液中，室溫條件置于搖床上搖動6min。注意：顯色的時間可控制在1-15min，直至出現比較理想的預期蛋白條帶。
- 終止：用去離子水稀釋10×終止液至1X終止液。取100ml 1X終止液，將顯色后的凝膠放入其中，室溫條件置于搖床上搖動，反應40min；
- 洗滌：用100ml去離子水洗30min，期間更換2次。
- 照相：保存顯色出的蛋白質條帶并記錄。
注意事項
- 顯色過程較快，要注意把握時間，避免染色過度。
- 所用器皿要很潔凈，不要用手直接接觸，以免雜蛋白污染。
- 清洗用水盡量用高純度去離子水如ddH2O，可以減少背景著色。
- 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
