詳細介紹
一、Elisa試劑盒概述
ELISA試劑盒在國內有許多種叫法:例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯免疫試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒、酶聯免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒等。 ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,得到*科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內生化領域的長足發展。 Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。
二、“小鼠網膜素(omentin)ELISA試劑盒”樣品收集、處理及保存
1)細胞培養上清:
適用于檢測體外培養的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細胞:
用PBS反復洗滌細胞3次,調整細胞濃度達到104-106/ml 左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:
在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:
包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標本:
切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:
如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-70 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現沉淀,應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
三、操作步驟
1)取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置30分鐘。
2)分組:取出96孔板,根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數,把剩余的板條繼續冷藏處理。分別設標準品組(6個濃度)、空白孔、待測樣品組。
3)標準品的稀釋:準備小試管6 只,依次編好號碼,先在各小試管中加入標準品稀釋液100ul,然后取原濃度標準品100ul加入一只已編好號的試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul加入第三只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第四只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul加入第五只試管中,充分混勻;然后在該試管中取100ul,棄掉。第六只試管作為0 號標準品。
注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設置復孔。
4)加樣:依照標準品的順序分別加入50ul的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入50ul的蒸餾水;其余微孔中先加樣品40ul然后再加生物素標記的抗體10ul。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
5)溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
6)洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒棄去,如此重復5 次,拍干。
7)加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入50ul的酶標溶液(空白對照孔除外)。
8)溫育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內于37℃恒溫孵育1小時。
9)洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置15-30s,充分清洗酶標板5次,用吸水紙*拍干。
10)顯色:各孔加入顯色劑A液50ul后,再加入顯色劑B液50ul。
11)終止:25-37℃下避光反應10-15分鐘,加入50ul終止液。
12)讀板:在450nm波長讀取各孔的OD值。
注:讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡,讀板時間控制在終止反應后的30分鐘內,以免影響準確性。
四、Elisa試劑盒特點
1、高效、靈敏、特異的抗體; 二、穩定的重復性和可靠性;
2、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
3、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型;
4、節省實驗經費。
五、“小鼠網膜素(omentin)ELISA試劑盒”優勢
1.嚴格的質控體系:所有試劑盒從原料到成品經過嚴格的質控,確保試劑盒質量及穩定性。
2.產品經過不斷優化,具有很好的靈敏度;
3.綜合指標特性,研發便捷操作的試劑盒;
4.檢測驗證樣本多樣;
5.專業的研發團隊為客戶提供個性化的定制服務;
6.提供食品安全藥物殘留ELISA試劑盒,以及代測服務;
7.多年實踐經驗的技術老師,保證滬鼎生物ELISA試劑盒完善專業的售后服務;
8.高靈敏度、高精密度,高重現性,高特異性。不僅有高可靠性的實驗結果,更為您節約實驗成本和時間。
六、運輸保障
■ 包裝內置生物冰袋2-8℃低溫運輸、保存!
■ 試劑盒存放與EPS泡沫盒中,三層包裝更加防止擠壓碰傷!
■ ELISA試劑盒fapiao、說明書放于自封袋中更防水!
■ 25mm泡沫箱防水耐摔,快遞暴力分揀也不怕!
七、“小鼠網膜素(omentin)ELISA試劑盒”客戶評論
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