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ELISA試劑盒試驗中出現的差錯如何糾正?
閱讀:1503發布時間:2020-1-25
在ELISA試劑盒的使用過程中,有時會出現一些差錯,那這些差錯如何糾正呢,我們需要找出原因。ELISA試劑盒操作過程多,新手操作不免會有過失。而這些過失許多是由細節不夠好構成的,削減過失的方法有許多,下面我們就來說說ELISA試劑盒試驗中出現的差錯的糾正方法。
1. 評價試劑的實用性,試劑的穩定與否,對率的凹凸到頭重要。在試劑啟用前,應進行陰、陽對照及樣品重復對比試驗,斷定試劑符合要求后方可運用。
2. 操作前仔細閱讀說明書,嚴峻依照說明書要求進行規范化操作。不同批號的試劑不可混用。值得改善的當地,重復試驗斷定成立后才干改善,比如洗板次數的掌握等。
3. 加樣要、快速。加樣不,酶生成物的量不能斷定,直接影響顯色作用。其他,顯色的深淺及A值的測定與參加顯色劑和間斷液的量有關,所以加樣應穩重。要求在必定時刻內加樣完畢的試驗,假如加樣緩慢,便呈現過失,而且試劑長時刻顯露在外,特別室溫過高時,保存期會縮短乃至失效。
4. 查驗技師應具有從事試驗室操作的基本素質和實踐經驗。能熟練操作試驗儀器、器械,具有必定總結和剖析問題的才干,對試驗中呈現的意外狀況能及時妥善解決。
5. 運用校對過的微量移液器,清掃天然過失。移液器與否對定量檢測尤為重要。
6. 嚴峻掌握顯色時刻,顯色時刻過短,參加間斷液反應間斷后,底物結合物的量過少,易呈現假陰性。超越顯色要求時刻后顯色,應判為假陽性,這或許與試劑本身有關。加顯色劑后當即顯色,不可報陽性,這或許是本底顯色的作用。
7. 洗刷*,洗板不*,酶結合物本底顯色會呈現假陽性。其他,洗刷液要新鮮,現用現配,陳腐的洗刷液會呈現本底增高現象,也或許呈現假陽性。
8. 嚴控反應時刻,反應時刻過長,酶失活;反應時刻過短,酶結合物不能與血清中的微生物抗原抗體充沛結合,生成物結構松懈不強健,簡略洗掉,都或許構成假陰性。
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