N6822NobleRyder DNA退火緩沖液(5×) 即用型試劑
【簡單介紹】
品牌 | 其他品牌 | 貨號 | N6822 |
---|---|---|---|
規格 | 1ml | 供貨周期 | 現貨 |
主要用途 | PCR相關 |
NobleRyder DNA退火緩沖液(5×) 即用型液體試劑N6822-1ml
【詳細說明】
DNA退火緩沖液(5×)
產品簡介:
DNA寡核苷酸退火緩沖液(Annealing Buffer for DNA Oligos)簡稱為DNA退火緩沖液,是一種可用于DNA oligo退火的緩沖液,可用于常規的DNA oligo的退火,尤其適合于較難退火的用于RNAi (也稱siRNA)質粒構建的DNA oligo的退火。由于RNAi質粒構建的DNA oligo通常由于含有約20個左右的互補序列,自身易形成發夾結構,從而影響兩條DNA oligo的正確退火。
NobleRyder Annealing Buffer for DNA Oligos(5×)能有效避免DNA oligo自身形成發夾結構,并且兩條oligo退火后可以直接和經酶切、純化的質粒連接,轉化后可以得到大量的陽性克隆。該本試劑操作簡單,只需把待退火的DNA oligo和Annealing Buffer for DNA Oligos(5×)按照一定比例混合后,置于PCR儀上進行程序降溫,約90min即可完成。
NobleRyder DNA退火緩沖液(5×) 即用型試劑
產品組成:
編號 名稱 | N6822 | Storage |
試劑(A): Annealing Buffer for DNA Oligos(5×) | 1ml | -20℃ |
試劑(B): Nuclease-Free Water | 5ml | RT |
使用說明書 | 1份 |
操作步驟(僅供參考):
1、 把待退火的DNA oligo用經滅菌的超純水或Nuclease-Free Water配制成50μM,同時溶解Annealing Buffer for DNA Oligos(5×),混勻備用
2、 按如下退火反應體系操作:
N uclease-Free Water | 40μl |
Annealing Buffer for DNA Oligos(5×) | 20μl |
DNA oligo A(50μM) | 20μl |
DNA oligo B(50μM) | 20μl |
Tatal | 100μl |
按照上述順序,依次加入并混勻,如果所用PCR儀沒有加熱蓋,可加入Mineral Oil防止液體揮發。
3、 按如下PCR儀的退火條件:
步驟 | 溫度 | 時間 | 作用 |
1 | 95℃ | 2min | Oligo充分變性 |
2 | 每90s下降1℃,降至25℃ | 約90min | 程序退火 |
3 | 4℃ | 長期保存 | 暫時存放 |
4、退火后可直接用于連接反應,也可以-20℃凍存備用。如果退火結束后打算進行酶切等其它反應,最好用純化試劑盒進行純化,或者確保退火產物在反應體系中體積不超過5%,以避免Annealing Buffer對后續的酶反應體系的干擾。
注意事項:
1.避免反復凍融,以免效率下降。
2.該試劑只適合于DNA oligo的退火,不適用于RNA oligo 的退火。
3.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期: 12個月有效。
NobleRyder DNA退火緩沖液(5×) 即用型試劑
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