制作光學顯微鏡切片樣本時所需用品簡介!
閱讀:4714 發布時間:2012-6-6
以下介紹制作光學顯微鏡切片樣本時所需之相關用品,包括載玻片、蓋玻片、切片刀、染料、封片膠等。
載玻片
載玻片之品質依不同廠商而有所差異,品質較差者略帶有淡藍色。載玻片又分有磨砂與光滑兩種,前者僅在玻片一端帶有磨砂,方便拿取,但若要貼上標籤,以光滑玻片較易黏貼。
載玻片的標準尺寸均為75mm(長)×25mm(寬),此規格與染色瓶、樣本盒等相互配合,也有特殊規格之載玻片或可以買市售之玻璃加以裁切。
載玻片之標準厚度為1mm,但此種價格較昂貴;亦有厚度稍厚者,但以不超過2mm為宜,過厚將超出集光器(condenser)之焦距而影響觀察。
蓋玻片
蓋玻片一形狀分為圓形、方形及長方形3種,圓形者直徑18mm;方形者有18 × 18mm及 22 × 22mm 兩種;長形者有20 × 30mm、20 × 40mm等。
蓋玻片之厚度規格區分No.00、No.0、、No.2、No.3等五種。
1. No.00:zui薄,厚度小于0.09mm,容易破。
2. No.0:厚度0.09~0.13mm。
3. :厚0.13~0.15mm,zui常用,不易破碎,易清潔。
4. No.2:厚0.17~0.25mm,厚度較大,適合用于低倍觀察用。
5. No.3:厚0.25~0.35mm,zui厚,僅用于乾封(dry whole mount)。
太厚的蓋玻片議會影響顯微鏡焦距之調整,尤其用高倍觀察時,如果蓋玻片太厚,則接物鏡(objective lens)常常會接觸到蓋玻片而無法成像,甚至會鴨壞蓋玻片、組織切片,亦會傷及接物鏡頭。
切片刀
切片刀有一般之剃刀或切片刀,一般剃刀較便宜,其刀鋒又分為單面(single-edge)與雙面(double-edge)兩種,Bond & Rebstock(1997)的研究認為雙面刀鋒的剃刀銳利度較好,單面刀鋒的較差。
而的切片刀其品質自然,表面均鍍有鐵氟龍(Teflon),刀鋒不易磨損,但價格zui貴。
不論剃刀或切片刀,新刀片的表面都有涂上防銹油,所以在使用前,能先用乾紙巾(用不織布,以免纖維棉屑殘留于刀鋒上)擦乾以免于切片污染組織。
染料(注5)
(1)Safranin O:配法有下列3種:
Safranin-O 1g + 50%酒精100c.c.配成酒精溶液。
Safranin-O 1g + 蒸餾水100c.c.配成水溶液。
Safranin-O 1g + 甲基纖維素 50c.c. + 95%酒精 50 c. c. + 蒸餾水 25 c. c. + 1.25 g 醋酸鈉 + 2.5 c.c. 甲醛 等配成混和溶液。
(2) Fast green:配法有下列2種:
Fast green 1g + 95% 酒精100 c.c 配成酒精溶液。
Fast green 0.15g + 甲基纖維素 100c.c + 100% 酒精100 c.c + 100 c.c 丁香油 等 配成混和溶液
(注5)若是皮膚或衣物不小心沾到上述染料時,可用以下溶液清洗:
(1)Safranin O:酒精與稀酸混和溶液。
(2)Fast green:氨水。
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