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相稱顯微鏡是做什么的？
閱讀：575 發(fā)布時(shí)間：2019-6-19
相稱顯微鏡是一種增加對(duì)比度的方法。可以在不染色的情況下看到活體細(xì)胞。
相稱顯微鏡，又叫相差顯微鏡（Phase contrast microscopy ）。相差是一種增加對(duì)比度的方法，可以在不染色的情況下看到活體細(xì)胞。
相稱顯微鏡是一種利用光的衍射和干涉現(xiàn)象將透過(guò)標(biāo)本的光線光程差或相位差轉(zhuǎn)換成肉眼可分辨的振幅差顯微鏡。提高了密度不同物質(zhì)圖像的明暗區(qū)別，可用于觀察未經(jīng)染色的細(xì)胞結(jié)構(gòu)。
位相差顯微鏡的原理為何？如何調(diào)整？
相差成像
人的眼睛能夠識(shí)別明與暗之差（光的強(qiáng)度）和顏色不同（光的波長(zhǎng)不同），但難以識(shí)別差別小的無(wú)色的透明物體。
光對(duì)無(wú)色透明物體（相位物體）并不引起明、暗和顏色的變化，而只產(chǎn)生所謂的相位差。可是這種相位差不能用肉眼識(shí)別，也就看不見(jiàn)這種相位物體了。
相差顯微鏡利用阿貝成像原理，把相位資訊轉(zhuǎn)化為振幅資訊，是觀察透明物體的關(guān)鍵。
光路原理
相差光路重要兩個(gè)元件是環(huán)形光闌和相位板
環(huán)形光闌：不同的環(huán)狀孔形成的光闌，它們的直徑和孔寬是與不同的物鏡相匹配的。由于透明圓環(huán)所成的像恰好落在物鏡后焦點(diǎn)平面和相板上的共軛面重合。因此，未發(fā)生偏斜的直射光便通過(guò)共軛面。其作用是將直射光所形成的像從一些衍射旁像中分出來(lái)。
相位板：安裝在物鏡的后焦面處，相板裝有吸收光線的吸收膜和推遲相位的相位膜。它除能推遲直射光線或衍射光的相位以外，還有吸收光使亮度發(fā)生變化的作用。
利用位相差聚光鏡及內(nèi)部位相環(huán)所構(gòu)成的環(huán)狀光圈，產(chǎn)生中空光錐通過(guò)聚光鏡、穿過(guò)檢體，經(jīng)過(guò)物鏡內(nèi)的光延遲位環(huán)板而成，因檢體折射指數(shù)不同，造成繞射光束與直射光束發(fā)生干涉作用，得到明暗對(duì)比的效果。調(diào)整位相差裝置，先選擇聚光鏡上與物鏡相同倍率之位相差環(huán)，所形成的亮環(huán)與物鏡內(nèi)的暗環(huán)配合，調(diào)整聚光鏡上亮環(huán)，使之重疊即可。
位相稱顯微鏡應(yīng)用
主要提供胚胎形態(tài)的觀察、胚胎級(jí)數(shù)的判別等特殊功用。解剖顯微鏡，提供睪丸取精之后，切取組織搜尋精子或采卵時(shí)搜尋卵子，因此臨床應(yīng)用于：
●觀察卵子及胚胎的發(fā)育情形。
●輔助胚胎植入前診斷之細(xì)胞核固定。
●精蟲顯微注射之應(yīng)用操作。
●胚胎輔助孵化之應(yīng)用操作。
相稱顯微鏡的優(yōu)勢(shì)：
我們一般用普通顯微鏡觀察試樣的顯微鏡組織，是靠試樣表面反射光的強(qiáng)弱（即黑白灰度的不同）來(lái)鑒別它。
有的顯微鏡組織由于其反射率和吸收率的不同而產(chǎn)生不同的灰度。反射率較大者，則組織較明亮：反射率較小者，組織比較灰暗。
當(dāng)試樣上兩相的反射系數(shù)相同，僅有因輕微侵蝕或各相硬度不同而使拋光時(shí)形成微小凹凸，或者有塑料性變形及第二類共格差別。
對(duì)此一般生物顯微鏡明場(chǎng)就不易鑒別，當(dāng)表面高低起伏極小時(shí)，更難辨別，而相稱技術(shù)成功地解決了這一問(wèn)題。一般表面高低差在100～1500Ao(1Ao=0.1NM)范圍內(nèi)均能用相稱顯微鏡來(lái)觀察。