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綠巨研科貿易(上海)有限...

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雞蛋專用柱 多農殘多獸殘分析前處理方法儀器分析方法

閱讀:3350      發布時間:2022-7-4
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 現行獸藥殘留檢驗由于藥物種類多及化學特性差異大,針對禽畜產品檢驗時需將藥劑分類以多種方法分別進行檢測,惟每個方法需要較繁復步驟及較多溶劑用量,同一樣品為求檢驗時效則無法針對太多項目進行檢測,致無法提升檢驗密度,只能選擇重點藥項進行監控;又基于樣品本身基質特性差異,前處理方法于各類樣品基質的適用性為一大挑戰。

 

當今較普遍的前處理方法為固相萃取法(SPE柱法),處理一批樣品至少需數小時且需使用大量溶劑沖堤凈化;另有不少學者采用QuEChERs法進行前處理,亦有很好的結果可供參考。

 

巨研科技公司以高效能綠色前處理技術為目標,研發出一種應用于食品中獸藥殘留檢驗的快速萃取前處理技術—FaVExFast Veterinary Extraction),為快速的獸藥殘留檢驗前處理技術,此技術結合了一支ZL凈化管(SPE柱)加上簡化的萃取步驟,達到節省時間與溶劑用量、操作簡單及再現性佳之效果,并基于雞蛋樣品的特性,發展出FaVEx-NM-Egg快速萃取凈化套組應用於雞蛋基質中多重獸藥殘留量分析 。

 

本研究以FaVEx-NM-Egg SPE柱(一步通過法獲取目標物)分析雞蛋樣品中多種獸藥,與傳統獸藥殘留前處理技術相比,樣品前處理整體效率可提高10倍以上,因操作更簡單,不須精密設備輔助,人力成本減少90%,有機溶劑的使用減少約90%,同時減少了廢棄物的產生。

 

此方法適用于雞蛋、蛋粉等雞蛋產品。

 

本篇搭配Agilent 6470液相色譜-三重四極桿質譜聯用儀,同時檢測添加濃度為5.0 ng/g12.5 ng/g之雞蛋樣品中離子型抗球蟲藥等102項獸藥殘留,本篇定量極限可達5 ng/g,為快速、穩定之檢驗方法。

 

分析結果如表所示,除Florfenicol(氟苯尼考)及lasalocid A(拉沙里菌素A)之外,其余100項藥項回收率均在50~120%范圍內,變異系數(CV)介于0.1~21.6之間。

 

Item

Compound Name

中文名

     

1

5-Hydroxythiabendazole

5-羥基噻苯達唑

2

Albendazole

阿苯達唑

3

Albendazole-Sulfone

阿苯達唑砜

4

Albendazole-Sulfoxide

阿苯達唑亞砜

5

Amino albendazole sulfone

阿苯達唑氨基砜

6

Amprolium

氨丙啉

7

Azaperol

氮哌醇

8

Azaperone

氮哌酮

9

Carazolol

卡拉洛爾

10

Carbadox

卡巴氧

11

Chloramphenicol

氯霉素

12

Ciprofloxacin

環丙沙星

13

Clarithromycin

克拉霉素

14

Clindamycin

克林霉素

15

Clopidol

氯羥吡啶

16

Cyromazine

滅蠅胺

17

Danofloxacin

達氟沙星

18

DCBX

脫氧卡巴氧

19

Decoquinate

癸氧喹酯

20

Diclazuril

地克株利

21

Dicyclanil

環蟲腈

22

Difloxacin

雙氟沙星

23

Dimetridazole

地美硝唑

24

Enrofloxacin

恩諾沙星

25

Eprinomectin-Na

依普菌素

26

Febantel

非班太爾

27

fenbendazole

苯硫咪唑

28

Fleroxacin

氟洛沙星

29

Florfenicol amine

氟苯尼考胺

30

Florfenicol

氟甲砜霉素

31

Fluazuron

吡蟲隆

32

Flubendazole

氟苯咪唑

33

Flumequine

氟甲喹

34

Furaltadone

呋喃它酮

35

Furazolidone

呋喃唑酮

36

Halofuginone

鹵夫酮

37

Josamycin

交沙霉素

38

Kitasamycin

吉他霉素

39

lasalocid A

拉沙洛菌素

40

Levamisole

左旋咪唑

41

Lomefloxacin

洛美沙星

42

Maduramycin

馬杜霉素

43

Marbofloxacin

馬波沙星

44

Mebendazole

甲苯咪唑

45

Metronidazole

甲硝唑

46

Monensin

莫能菌素

47

Morantel

甲噻吩嘧啶

48

Nalidixic acid

萘啶酮酸

49

Narasin

那拉霉素

50

Neospiramycin I

新螺旋霉素

51

Nicarbazin

尼卡巴嗪

52

Nitrovin

雙呋脒腙

53

Norfloxacin

諾氟沙星

54

Novobiocin

新生霉素

55

Ofloxacin

氟嗪酸

56

Olaquindox

喹乙醇

57

Oleandomycin

竹桃霉素

58

Orbifloxacin

奧比沙星

59

Ormetoprim

奧美普林

60

Oxfendazole-Sulfone

磺唑氨酯

61

Oxolinic acid

惡喹酸

62

Pefloxacin

培氟沙星

63

Pipemidic acid

吡哌酸

64

Piromidic acid

吡咯酸

65

Pyrimethamine

乙胺嘧啶

66

Robenidine

氯苯胍

67

Ronidazole

羅硝唑

68

Salinomycin

沙利霉素

69

Sarafloxacin

沙拉沙星

70

Spiramycin I

螺旋霉素 I

71

Succinylsulfathizole

琥珀酰磺胺噻唑

72

Sulfabenzamide

磺胺苯酰

73

Sulfacetamide

磺胺醋酰

74

Sulfachlorpyridazine

磺胺氯噠嗪

75

Sulfaclozine

磺胺氯吡嗪

76

Sulfadiazine

磺胺嘧啶

77

Sulfadimethoxine

磺胺二甲氧嘧啶

78

Sulfadoxine

磺胺多辛

79

Sulfaethoxypyridazine

磺胺乙氧化吡嗪

80

Sulfaguanidine

磺胺脒

81

Sulfamerazine

磺胺甲基嘧啶

82

Sulfameter

磺胺對甲氧嘧啶

83

Sulfamethazine

磺胺二甲基嘧啶

84

Sulfamethizole

磺胺甲二唑

85

Sulfamethoxazole

磺胺甲基異惡唑

86

Sulfamethoxypyridazine

磺胺甲氧嗪

87

Sulfamonomethoxine

磺胺間甲氧嘧啶

88

Sulfapyridine

磺胺吡啶

89

Sulfaquinoxaline

磺胺喹惡啉

90

Sulfathiazole

磺胺噻唑

91

Sulfatroxazole

磺胺曲沙唑

92

Sulfisomidine

磺胺二甲異嘧啶

93

Sulfisoxazole

磺胺異惡唑

94

Tetramisole

四咪唑

95

Thiabendazole

噻苯唑

96

Thiamphenicol

甲砜霉素

97

Tiamulin

泰妙菌素

98

Tilmicosin

替米考星

99

Trichlorfon

敵百蟲

100

Trimethoprim

甲氧芐啶

101

Tylosin

泰樂菌素

102

Virginiamycin M1

維吉尼亞霉素M1

 

(一) 樣品制備流程

 

1.1 耗材與試劑

1%醋酸乙腈、無水硫酸鈉、高速振蕩機、離心機、FaVEx-NM-egg SPE柱、手壓或正壓壓柱機、濃縮儀、0.22um的濾膜。

 

1.2 前處理操作步驟

 

image.png

 

 

1.3 注意事項

1、 FaVEx-NM-egg SPE柱需要與10mL的一次性塑料注射器配合使用。

2、 正壓凈化*:搭配正壓壓柱機使用,批量壓柱6FaVEx-NM-egg凈化柱。

3、 *回溶液:甲醇/水 ( V / V = 6 / 4 )溶液。                                                                                                              

4**待測物LOQ要求較低時,可取濾液濃縮2-10倍;最大濃縮倍率:取5mL濾液,濃縮至近干后以500µL的回溶液回溶)

5、推薦使用HPPE-48高通量真空加熱振蕩濃縮儀,快速自動濃縮到近干,不放通風櫥也沒有異味,或氮吹濃縮儀等同等功能的濃縮設備。      

 

(二) 液相層析參考條件

 

移動相流速:0.3 mL/min

層析管柱:ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18

內徑3.0 × 150mm 1.8-Micron

流動相溶液-A液:水+0.1%甲酸

流動相溶液-B液:甲醇+0.1%甲酸

流動相溶液:A液與B液以下列條件進行梯度分析

分析儀器:1290/6470液相色譜-三重四極桿質譜聯用儀(Agilent)

*回溶液:甲醇/( V / V = 6 / 4 )溶液

時間(min)

A(%) 

B(%) 

0.0

98

2

2.5

95

5

3.5

80

20

6.0

75

25

8.0

70

30

11.5

50

50

13.0

30

70

14.0

10

90

14.5

5

95

20.0

5

95

24.0

98

2

post time4.0 min

表一、獸藥102項藥劑之多重反應偵測模式參數

image.png

圖一、雞蛋樣品之102項多重獸藥LC/MS/MS-MRM圖譜(添加樣品濃度為5.0 ng/g

image.png                                                                                                                                          

 圖二、雞蛋樣品之102項多重獸藥LC/MS/MS-MRM圖譜(添加樣品濃度為12.5 ng/g

表二、以FaVEx-NM-Egg凈化雞蛋樣品萃取液之多重獸藥102項藥劑之回收率 
   和變異系數   

(添加5.0 ng/g12.5 ng/g于雞蛋樣品)

 

(三) 結論

本研究以FaVEx-NM-Egg SPE柱分析雞蛋樣品中多種獸藥,與傳統獸藥殘留前處理技術相比,樣品前處理整體效率可提高10倍以上,因操作更簡單,不須精密設備輔助,人力成本減少90%,有機溶劑的使用減少約90%,同時亦減少了廢棄物的產生。

 

雞蛋基于本身基質特性與一般禽畜肌肉類樣品差異較大,FaVEx-NM-Egg SPE柱針對雞蛋類樣品提供更好的凈化及萃取效果,此方法適用于雞蛋、蛋粉等雞蛋產品。

 

本篇搭配Agilent 6470液相色譜-三重四極桿質譜聯用儀,同時檢測添加濃度為5.0 ng/g12.5 ng/g之雞蛋樣品中離子型抗球蟲藥等102項獸藥殘留(項目列表詳見表)。 分析結果除Florfenicol(氟苯尼考)及lasalocid A之外,其余100項藥項回收率均在50~120%范圍內,變異系數介于0.1~21.6之間。本篇定量極限可達5 ng/g,為快速、穩定之檢驗方法。

 

另有FaVEx-NM-egg凈化雞蛋基質,檢測多種農藥的藥劑清單,歡迎聯絡詢問。

                         

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