當今較普遍的前處理方法為固相萃取法(SPE柱法),處理一批樣品至少需數小時且需使用大量溶劑沖堤凈化;另有不少學者采用QuEChERs法進行前處理,亦有很好的結果可供參考。
巨研科技公司以高效能綠色前處理技術為目標,研發出一種應用于食品中獸藥殘留檢驗的快速萃取前處理技術—FaVEx(Fast Veterinary Extraction),為快速的獸藥殘留檢驗前處理技術,此技術結合了一支ZL凈化管(SPE柱)加上簡化的萃取步驟,達到節省時間與溶劑用量、操作簡單及再現性佳之效果,并基于雞蛋樣品的特性,發展出FaVEx-NM-Egg快速萃取凈化套組應用於雞蛋基質中多重獸藥殘留量分析 。
本研究以FaVEx-NM-Egg SPE柱(一步通過法獲取目標物)分析雞蛋樣品中多種獸藥,與傳統獸藥殘留前處理技術相比,樣品前處理整體效率可提高10倍以上,因操作更簡單,不須精密設備輔助,人力成本減少90%,有機溶劑的使用減少約90%,同時減少了廢棄物的產生。
此方法適用于雞蛋、蛋粉等雞蛋產品。
本篇搭配Agilent 6470液相色譜-三重四極桿質譜聯用儀,同時檢測添加濃度為5.0 ng/g、12.5 ng/g之雞蛋樣品中離子型抗球蟲藥等102項獸藥殘留,本篇定量極限可達5 ng/g,為快速、穩定之檢驗方法。
分析結果如表所示,除Florfenicol(氟苯尼考)及lasalocid A(拉沙里菌素A)之外,其余100項藥項回收率均在50~120%范圍內,變異系數(CV)介于0.1~21.6之間。
Item | Compound Name | 中文名稱 |
1 | 5-Hydroxythiabendazole | 5-羥基噻苯達唑 |
2 | Albendazole | 阿苯達唑 |
3 | Albendazole-Sulfone | 阿苯達唑砜 |
4 | Albendazole-Sulfoxide | 阿苯達唑亞砜 |
5 | Amino albendazole sulfone | 阿苯達唑氨基砜 |
6 | Amprolium | 氨丙啉 |
7 | Azaperol | 氮哌醇 |
8 | Azaperone | 氮哌酮 |
9 | Carazolol | 卡拉洛爾 |
10 | Carbadox | 卡巴氧 |
11 | Chloramphenicol | 氯霉素 |
12 | Ciprofloxacin | 環丙沙星 |
13 | Clarithromycin | 克拉霉素 |
14 | Clindamycin | 克林霉素 |
15 | Clopidol | 氯羥吡啶 |
16 | Cyromazine | 滅蠅胺 |
17 | Danofloxacin | 達氟沙星 |
18 | DCBX | 脫氧卡巴氧 |
19 | Decoquinate | 癸氧喹酯 |
20 | Diclazuril | 地克株利 |
21 | Dicyclanil | 環蟲腈 |
22 | Difloxacin | 雙氟沙星 |
23 | Dimetridazole | 地美硝唑 |
24 | Enrofloxacin | 恩諾沙星 |
25 | Eprinomectin-Na | 依普菌素 |
26 | Febantel | 非班太爾 |
27 | fenbendazole | 苯硫咪唑 |
28 | Fleroxacin | 氟洛沙星 |
29 | Florfenicol amine | 氟苯尼考胺 |
30 | Florfenicol | 氟甲砜霉素 |
31 | Fluazuron | 吡蟲隆 |
32 | Flubendazole | 氟苯咪唑 |
33 | Flumequine | 氟甲喹 |
34 | Furaltadone | 呋喃它酮 |
35 | Furazolidone | 呋喃唑酮 |
36 | Halofuginone | 鹵夫酮 |
37 | Josamycin | 交沙霉素 |
38 | Kitasamycin | 吉他霉素 |
39 | lasalocid A | 拉沙洛菌素 |
40 | Levamisole | 左旋咪唑 |
41 | Lomefloxacin | 洛美沙星 |
42 | Maduramycin | 馬杜霉素 |
43 | Marbofloxacin | 馬波沙星 |
44 | Mebendazole | 甲苯咪唑 |
45 | Metronidazole | 甲硝唑 |
46 | Monensin | 莫能菌素 |
47 | Morantel | 甲噻吩嘧啶 |
48 | Nalidixic acid | 萘啶酮酸 |
49 | Narasin | 那拉霉素 |
50 | Neospiramycin I | 新螺旋霉素 |
51 | Nicarbazin | 尼卡巴嗪 |
52 | Nitrovin | 雙呋脒腙 |
53 | Norfloxacin | 諾氟沙星 |
54 | Novobiocin | 新生霉素 |
55 | Ofloxacin | 氟嗪酸 |
56 | Olaquindox | 喹乙醇 |
57 | Oleandomycin | 竹桃霉素 |
58 | Orbifloxacin | 奧比沙星 |
59 | Ormetoprim | 奧美普林 |
60 | Oxfendazole-Sulfone | 磺唑氨酯 |
61 | Oxolinic acid | 惡喹酸 |
62 | Pefloxacin | 培氟沙星 |
63 | Pipemidic acid | 吡哌酸 |
64 | Piromidic acid | 吡咯酸 |
65 | Pyrimethamine | 乙胺嘧啶 |
66 | Robenidine | 氯苯胍 |
67 | Ronidazole | 羅硝唑 |
68 | Salinomycin | 沙利霉素 |
69 | Sarafloxacin | 沙拉沙星 |
70 | Spiramycin I | 螺旋霉素 I |
71 | Succinylsulfathizole | 琥珀酰磺胺噻唑 |
72 | Sulfabenzamide | 磺胺苯酰 |
73 | Sulfacetamide | 磺胺醋酰 |
74 | Sulfachlorpyridazine | 磺胺氯噠嗪 |
75 | Sulfaclozine | 磺胺氯吡嗪 |
76 | Sulfadiazine | 磺胺嘧啶 |
77 | Sulfadimethoxine | 磺胺二甲氧嘧啶 |
78 | Sulfadoxine | 磺胺多辛 |
79 | Sulfaethoxypyridazine | 磺胺乙氧化吡嗪 |
80 | Sulfaguanidine | 磺胺脒 |
81 | Sulfamerazine | 磺胺甲基嘧啶 |
82 | Sulfameter | 磺胺對甲氧嘧啶 |
83 | Sulfamethazine | 磺胺二甲基嘧啶 |
84 | Sulfamethizole | 磺胺甲二唑 |
85 | Sulfamethoxazole | 磺胺甲基異惡唑 |
86 | Sulfamethoxypyridazine | 磺胺甲氧嗪 |
87 | Sulfamonomethoxine | 磺胺間甲氧嘧啶 |
88 | Sulfapyridine | 磺胺吡啶 |
89 | Sulfaquinoxaline | 磺胺喹惡啉 |
90 | Sulfathiazole | 磺胺噻唑 |
91 | Sulfatroxazole | 磺胺曲沙唑 |
92 | Sulfisomidine | 磺胺二甲異嘧啶 |
93 | Sulfisoxazole | 磺胺異惡唑 |
94 | Tetramisole | 四咪唑 |
95 | Thiabendazole | 噻苯唑 |
96 | Thiamphenicol | 甲砜霉素 |
97 | Tiamulin | 泰妙菌素 |
98 | Tilmicosin | 替米考星 |
99 | Trichlorfon | 敵百蟲 |
100 | Trimethoprim | 甲氧芐啶 |
101 | Tylosin | 泰樂菌素 |
102 | Virginiamycin M1 | 維吉尼亞霉素M1 |
(一) 樣品制備流程
1.1 耗材與試劑
1%醋酸乙腈、無水硫酸鈉、高速振蕩機、離心機、FaVEx-NM-egg SPE柱、手壓或正壓壓柱機、濃縮儀、0.22um的濾膜。
1.2 前處理操作步驟
1.3 注意事項
1、 FaVEx-NM-egg SPE柱需要與10mL的一次性塑料注射器配合使用。
2、 正壓凈化*:搭配正壓壓柱機使用,批量壓柱6只FaVEx-NM-egg凈化柱。
3、 *回溶液:甲醇/水 ( V / V = 6 / 4 )溶液。
4、**待測物LOQ要求較低時,可取濾液濃縮2-10倍;最大濃縮倍率:取5mL濾液,濃縮至近干后以500µL的回溶液回溶)。
5、推薦使用HPPE-48高通量真空加熱振蕩濃縮儀,快速自動濃縮到近干,不放通風櫥也沒有異味,或氮吹濃縮儀等同等功能的濃縮設備。
(二) 液相層析參考條件
移動相流速:0.3 mL/min
層析管柱:ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18
內徑3.0 × 150mm 1.8-Micron
流動相溶液-A液:水+0.1%甲酸
流動相溶液-B液:甲醇+0.1%甲酸
流動相溶液:A液與B液以下列條件進行梯度分析
分析儀器:1290/6470液相色譜-三重四極桿質譜聯用儀(Agilent)
*回溶液:甲醇/水( V / V = 6 / 4 )溶液
時間(min) | A(%) | B(%) |
0.0 | 98 | 2 |
2.5 | 95 | 5 |
3.5 | 80 | 20 |
6.0 | 75 | 25 |
8.0 | 70 | 30 |
11.5 | 50 | 50 |
13.0 | 30 | 70 |
14.0 | 10 | 90 |
14.5 | 5 | 95 |
20.0 | 5 | 95 |
24.0 | 98 | 2 |
post time:4.0 min
表一、獸藥102項藥劑之多重反應偵測模式參數
圖一、雞蛋樣品之102項多重獸藥LC/MS/MS-MRM圖譜(添加樣品濃度為5.0 ng/g)
圖二、雞蛋樣品之102項多重獸藥LC/MS/MS-MRM圖譜(添加樣品濃度為12.5 ng/g)
表二、以FaVEx-NM-Egg凈化雞蛋樣品萃取液之多重獸藥102項藥劑之回收率
和變異系數
(添加5.0 ng/g、12.5 ng/g于雞蛋樣品)
(三) 結論
本研究以FaVEx-NM-Egg SPE柱分析雞蛋樣品中多種獸藥,與傳統獸藥殘留前處理技術相比,樣品前處理整體效率可提高10倍以上,因操作更簡單,不須精密設備輔助,人力成本減少90%,有機溶劑的使用減少約90%,同時亦減少了廢棄物的產生。
雞蛋基于本身基質特性與一般禽畜肌肉類樣品差異較大,FaVEx-NM-Egg SPE柱針對雞蛋類樣品提供更好的凈化及萃取效果,此方法適用于雞蛋、蛋粉等雞蛋產品。
本篇搭配Agilent 6470液相色譜-三重四極桿質譜聯用儀,同時檢測添加濃度為5.0 ng/g、12.5 ng/g之雞蛋樣品中離子型抗球蟲藥等102項獸藥殘留(項目列表詳見表)。 分析結果除Florfenicol(氟苯尼考)及lasalocid A之外,其余100項藥項回收率均在50~120%范圍內,變異系數介于0.1~21.6之間。本篇定量極限可達5 ng/g,為快速、穩定之檢驗方法。
另有FaVEx-NM-egg凈化雞蛋基質,檢測多種農藥的藥劑清單,歡迎聯絡詢問。
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