詳細介紹
商品介紹:
測定意義 GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物體內氨同化的關鍵酶之一,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺,不僅可以防止過多的銨離子對生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要儲存和運輸形式。 測定原理 GS在ATP和Mg2+存在下,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺進一步轉化為γ─谷氨酰基異羥肟酸,在酸性條件下與鐵形成紅色的絡合物;該絡合物在540nm處有最大吸收峰,可用分光光度計測定。 所需的儀器和用品 可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規格 | 50管/24樣 |
產品貨號 | AS632196 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
Vildagliptin(標準品)英文名: Ifosfamide促腎上腺皮質激釋放因子抗體包裝1g
α-甘(標準品)英文名: Ifosfamide促腎上腺皮質激釋放因子抗體包裝5g
α-對羥基甘(標準品)英文名: Pramipexole 2HCL monohydrate5號染色體開放閱讀框54抗體包裝1g
α-代-β-英文名: Pramipexole 2HCL monohydrateCD93抗體包裝5g
α-基吡啶(標準品)英文名: Vinblastine Sulfate嗜粒趨化蛋白CCL6抗體包裝5g
α-三聯噻吩(標準品)英文名: Vinblastine Sulfate6號染色體開放閱讀框81抗體包裝1g
α-戊二(標準品)英文名: Vinblastine Sulfate巨噬炎性蛋白1β抗體包裝1g
β-Estradiol(標準品)英文名: TemozolomideNK抑制性受體2DL4抗體包裝5g
β-(標準品)英文名: TemozolomideNK抑制性受體2DS4抗體包裝1g
β-環糊精(標準品)英文名: AminoglutethimideNK抑制性受體3DL1抗體包裝5g
阿達唑(標準品)英文名: Aminoglutethimide7號染色體開放閱讀框46抗體包裝100g
阿達帕林(標準品)英文名: Flutamide蛋白磷PP2A癌抑制蛋白抗體包裝25g
阿德福韋(標準品)英文名: Flutamide巨噬甘露糖受體CD206抗體包裝1g
阿德福韋/阿德福韋酯(標準品)英文名: Cyclophosphamide淋巴衍生C-型凝集抗體包裝5g
(標準品)英文名: Cyclophosphamide5號染色體開放閱讀框60抗體包裝1g
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:HPLC>98%,標準品血管生成抑制因子試劑盒新對葉百部堿;Neotuberostem
慢生大豆根瘤菌Bradyrhizobium│japonicum 質量規格:含量>98.5%,BR血管生成樣蛋白4試劑盒小蕓木;Micromelin
ATCC17588=IFO14165=IAM12668資源名稱: 施氏假單胞菌 質量規格:>98.5%,BR血管生成樣蛋白3試劑盒薟精;Darutigenol
谷氨酰胺合成酶(GS)測試盒50管/24樣五通橋毛霉 順-4-環己烯-1,2-二羧酸風疹病IgG抗體Elisa
球型接合酵母 2-(1-咪唑基)乙酸流行性腮腺炎病IgG抗體Elisa
地衣芽孢桿 6-溴己酰神經絲中鏈蛋白MElisa
釀酒酵母 2,6-二氟苯Ⅷ相關抗原Elisa
枯草芽孢桿 2,3,4-三氟苯酸磷酸化tauElisa
葡萄擬莖點霉 異硫酸異酯腮腺炎病IgM抗體Elisa
灰葡萄孢(測序正確) (1R,2R,3S,5R)-(-)-2,3-蒎烷二水痘帶狀皰疹病IgM抗體Elisa
根瘤 5-丁基噁唑-2,RNA結合基元蛋白8Elisa
鹽地喜鹽芽孢桿 D(-)-阿糖酸鈣CXC趨化因子配體1Elisa
根霉 N-乙烯基己內酰輪狀病Elisa
*豬苓 2',4'-二苯乙酮甲酰甲硫Elisa
粘質沙雷氏 3,5-二甲基-4-羥基苯甲抗小鼠抗體Elisa
丁香鏈霉 1-(對甲苯磺酰)咪唑多配體蛋白聚糖1Elisa
蘋果鏈格孢 硫代甲肼核因子κB受體激活因子配體Elisa
盤長孢狀盤孢 2-羥基異單純皰疹病Ⅰ+Ⅱ型IgM抗體Elisa
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。