詳細介紹
公司產品僅供科研研究實驗
一、細胞基本屬性 | |
細胞名稱 | 豬卵巢顆粒細胞 |
組織來源 | 卵巢組織 |
商品貨號 | A01X2275 |
種屬來源 | 豬 |
產品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
細胞簡介 | 卵巢是雌性動物的生殖器官。卵巢的功能是產生卵以及類固醇激素。它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結締組織。卵巢的內部結構可分為皮質和髓質。皮質位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結締組織構成;髓質位于中央,由疏松結締組織構成,其中有許多血管、淋巴管和神經。 卵巢是分泌雌激素的主要器官。卵巢分泌的雌激素主要是雌二醇。卵巢中顆粒細胞是合成雌激素的場所。其產生過程是使雄烯二酮轉變成雌激素:內膜細胞在LH的作用下,使固醇轉變?yōu)樾巯┒?;顆粒細胞在FSH的作用,發(fā)育過程中產生芳香化酶,它使雄烯二酮轉變成雌激素。形成的雌激素分泌到卵泡液和血液中。 |
包被條件 | |
培養(yǎng)基 | 原代卵巢顆粒細胞培養(yǎng)體系 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
生長特性 | 貼壁 |
細胞形態(tài) | 不規(guī)則細胞 |
傳代特性 | 根據細胞特性 |
消化液 | 0.25%胰蛋bai酶 |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
原代細胞培養(yǎng):
原代細胞(Primary cells):是指直接從機體取出的組織或細胞獲得單個細胞并在體外進行培養(yǎng)的細胞。這里的組織主要指:組織器官、外周血及胚胎等。
原代細胞培養(yǎng):由于原代細胞生長緩慢,繁殖一定的代數停止生長(一般10代以內)。所以一般認為:培養(yǎng)的原代的第1和傳代到第10代以內的細胞統稱為原代細胞培養(yǎng)。
具體步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
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注意事項:
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術部溝通。