詳細介紹
商品介紹:
測定意義 尿素是生物體內含氮化合物分解的終產物,在尿酶催化下分解轉化成氨。血液尿素氮是腎功能的主要指標之一。 測定原理 在堿性條件下,尿酶水解尿素產生氨,氨與次氯酸反應生成氯胺,再與酚衍生物作用生成綠色吲哚酚,在630nm處有特征吸收峰。 自備實驗用品及儀器 天平、研缽、常溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。 |
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產品規格 | 100管/48樣 |
產品貨號 | AS6321103 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
(標準品)英文名: Cetirizine 2HCl磷化表面趨化因子受體4抗體包裝25g
(標準品)英文名: Cetrorelix Acetate磷化表面趨化因子受體2抗體包裝5g
地紅霉(標準品)英文名: Chelerythrine中心體蛋白104抗體包裝100mg
地喹(標準品)英文名: Chlorhexidine Acatate/乙磷轉移1抗體包裝1g
地羅司(標準品)英文名: Fluvastatin sodium salt6號染色體開放閱讀框163抗體包裝500mg
地雷他定(標準品)英文名: Fluvastatin sodium salt6號染色體開放閱讀框165抗體包裝1g
磷酯(標準品)英文名: Clinafloxacin6號染色體開放閱讀框168抗體包裝250mg
/ 5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷(標準品)英文名: Levamisole HCl6號染色體開放閱讀框173抗體包裝5g
海(標準品)英文名: Levamisole HCl6號染色體開放閱讀框182抗體包裝1g
海雜質Ⅰ(標準品)英文名: Clomipramine HCL 6號染色體開放閱讀框186抗體包裝5g
海雜質Ⅱ(標準品)英文名: Clomipramine HCL 6號染色體開放閱讀框191抗體包裝10g
海雜質Ⅲ(標準品)英文名: Clopidogrel Bisulfate6號染色體開放閱讀框195抗體包裝1g
化(標準品)英文名: Clopidogrel Bisulfate6號染色體開放閱讀框199抗體包裝5g
帕(標準品)英文名: Clopidogrel Bisulfate7號染色體開放閱讀框34抗體包裝1g
普羅(標準品)英文名: Nabumetone6號染色體開放閱讀框201抗體包裝100g
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格:>98.0%雄烯二新;Mesaconitine
雅致小克銀漢霉(斜面)Cunninghamella elegans 質量規格:≥98.0%雄激受體試劑盒新;Neohesperidin
墻壁圣格奧爾根菌Georgenia│muralis 質量規格:>98%,USP31,BR胸腺依賴性抗原試劑盒細葉遠志皂苷;Tenuifolin
尿素氮測試盒100管/48樣*灰葡萄孢 2,3,5,6-四溴對二甲苯BK病IgMkan抗體Elisa
假單胞 異丁酸香葉酯磷酯Cε鏈1Elisa
釀酒酵母 異丁酸橙花酯CD2關聯蛋白Elisa
龜裂鏈霉 2-氟烯酸甲酯轉化受體電位陽離子通道亞家族C成員6Elisa
金黃桿屬 5--2-三氟甲苯褐黑Elisa
產氨棒桿 5--2-甲苯γ谷氨酰轉移2Elisa
堀越氏芽孢桿 4-三氟乙優黑Elisa
產朊假絲酵母 檸檬酸鐵 水合物雌酮1Elisa
薄層桿 3-溴-5-吡啶Rho關聯含卷曲螺旋蛋白激1Elisa
產氨棒桿 反式-4-乙酰氨基環己Rho關聯含卷曲螺旋蛋白激2Elisa
狂犬病病 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine總巰基Elisa
少根根霉 (R)-1,2,3,4-四氫-1-萘酸色Elisa
粉狀畢翅酵母 3-吡啶甲脒蛋白聚糖Elisa
葡枝根霉 6-羥基吲唑雌受體βElisa
豌豆根瘤 2,5-二溴吡總表皮生長因子受體Elisa
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。