商品介紹:
測定意義: 糖類物質(zhì)是構(gòu)成植物體的重要組成成分之一,也是新陳代謝的主要原料和貯存物質(zhì)。總糖是指樣品中的還原單糖及在本法測定條件下能水解成還原單糖的蔗糖、麥芽糖和可部分水解為葡萄糖的淀粉。 測定原理: 蒽酮比色法。可用于可溶性單糖、寡糖和多糖的含量測定,具有靈敏度高﹑簡便快捷﹑適用于微量樣品的測定等優(yōu)點(diǎn)。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、沸水浴、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、濃硫酸(不允許快遞)研缽、和蒸餾水。 |
商品屬性:
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
黑老虎(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Allocryptopine Klotho多肽蛋白抗體包裝100g
黑螞蟻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: LGD4033 鈣激活通道蛋白4抗體包裝25g
黑芝麻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 5-Bromopyrimidine Kelch樣蛋白23抗體包裝5g
黑種草子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 17-DMAGBTB-kelch蛋白家族10抗體包裝1g
紅參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Soybean isoflavonesBTB-kelch蛋白家族4抗體包裝5g
紅參蘆(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 5-Bromoindole Kelch樣蛋白24抗體包裝1g
紅穿破石(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Ibrutinib,PCI-32765Kelch樣蛋白21抗體包裝25g
紅大戟(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: (R)-LansoprazoleKelch樣蛋白25抗體包裝5g
紅豆蔻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: (R)-Lansoprazole驅(qū)動(dòng)蛋白KNS1抗體包裝1g
紅杜仲(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Lenvatinib(E7080)驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員1B抗體包裝5g
紅花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: PR171 intermedaite I劍蛋白p80抗體包裝25g
紅花龍膽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Benzyl bromide 樣蛋白1抗體包裝5g
紅景天(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: PR171 intermedaite II組蛋白H3K9基轉(zhuǎn)移4抗體包裝1g
紅景天苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: (alphaS)-alpha-[(4-Morpholinylacetyl)amino]benzenebutanoyl-L-leucyl-L-phenylalanine離子通道蛋白家族成員3抗體包裝250mg
紅景天;草質(zhì)甙;英文名: Boc-HPh-Leu-Phe-Ome角蛋白82抗體包裝1g
鮑氏志賀菌Shigella│boydii 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品抗外切體復(fù)合物成分RRP45試劑盒根皮;Phloretin
溫和氣單胞菌Aeromonas│sobria 質(zhì)量規(guī)格:>98.5(C8H9N3O4干品),BR,可用于培養(yǎng)抗外切體成分10試劑盒喹;Gliquidone
: P-1資源名稱: 巴氏葡萄球菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體試劑盒齊特;Gliclazide
植物可溶性糖含量測試盒100管/96樣皮狀絲孢酵母 2-溴乙基芐酯直鏈淀粉Elisa
西藏木霉 3-甲苯并噻吩支鏈淀粉Elisa
科羅多擬無枝酸 去甲托品硝酸還原糖Elisa
粒狀青霉 噻吩-2-羧酸甲酯γ-谷氨酰環(huán)化轉(zhuǎn)移Elisa
木耳 2,6-雙(甲氧羰基)-4-吡啶程序性死亡分子-1Elisa
側(cè)孢短芽孢桿 鹽酸西律草膦乙酰轉(zhuǎn)移Elisa
枯草芽孢桿枯草亞種 3-異基苯苯Elisa
灰葡萄孢(灰霉病) 2-硝基-3-甲苯苯Elisa
卷枝毛霉詹森變型 3-氨基-5-吡唑絲;蘇蛋白磷酸Elisa
矮小青霉 鹽酸達(dá)克羅寧鳥苷酸激Elisa
墻壁圣格奧爾根 4-嗎啉淀粉磷酸化Elisa
寬鱗大孔 L-酪芐酯對(duì)甲苯磺酸鹽Atxin-3蛋白Elisa
異常威克漢姆酵母 1,4-二氫-2-甲巰基-4-氧代-5-嘧啶甲酸乙酯磷脂酰乙-N-甲基轉(zhuǎn)移Elisa
紫芝 4-溴芐磺酰5羥色Elisa
枯草芽孢桿 2,6-二肉桂酸乙酰Elisa
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。