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TNE緩沖液

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更新時(shí)間:2022-08-30 09:48:52瀏覽次數(shù):417

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100ml
貨號(hào) FS-R7334 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 貨號(hào) FS-R7334
TNE緩沖液公司正在銷售的產(chǎn)品:Anti-Phospho HIRA (Thr555) Antibody人橋粒芯糖蛋白-1
Anti-Phospho IL7R (Y449) Antibody大鼠抗心磷脂抗體IgM
Anti-Phospho HS1(Tyr397) Antibody大鼠抗心磷脂抗體IgA
Anti-Phospho IFNAR1 (Ser535,539) Antibody小鼠骨鈣素/骨谷

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品分類:DNA溶液

儲(chǔ)存條件:室溫,12個(gè)月

用途:吸光光譜學(xué)檢測(cè)核酸,亦作為調(diào)零

注意事項(xiàng):主要由氯化鈉、EDTA、Tris組成。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購(gòu)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

TNE緩沖液

100ml

FS-R7334

 

63.jpg 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來(lái)水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。

13.jpg 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定:

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái),保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來(lái)實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過(guò)夜;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4)  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

出芽短梗霉活化蛋白激D抗體Human PSMB3 ELISA Kit乙呋(AD)

異常威克漢姆酵母Jun激活區(qū)域-連接蛋白1抗體Human PSMD2 ELISA Kit胰脂肪(PL)

大腸埃希氏菌磷化蛋白酪激JAK-2抗體Human PSMB6 ELISA Kit胰抑制(Pancreastatin)

黑曲霉蛋白酪激JAK-3抗體Human PSMD3 ELISA Kit胰激肽原(PK)

Cystofilobasidium磷化蛋白酪激JAK-3抗體Human PSMD5 ELISA Kit胰高血糖樣肽2受體(GLP2R)

黑曲霉磷化蛋白酪激JAK-3抗體Human PSMB7 ELISA Kit胰高血糖樣肽2(GLP2)

球孢白僵菌磷化原癌基因c-Jun抗體Human PSMC2(Proteasome 26S subunit ATPase 2) ELISA Kit胰高血糖樣肽1受體(GLP1R)

黑曲霉蛋白質(zhì)酪激JAK2抗體Human CECR1(Adenosine deaminase CECR1) ELISA Kit胰高血糖樣肽1(GLP-1)

釀酒酵母JWA蛋白抗體Human PSMC1 ELISA Kit胰高血糖(GC)

燕麥鐮孢連接蛋白JPH3抗體Human PSMC4(Proteasome 26S subunit ATPase 4)  ELISA Kit胰多肽(PP)

釀酒酵母連接粘附分子C抗體Human PSMC6(Proteasome 26S subunit ATPase 6)  ELISA Kit胰淀(Amylin)

厚環(huán)乳牛肝菌蛋白質(zhì)酪激JAK-1抗體Human PSMD10 ELISA Kit胰淀粉(PAMY)

拜耳接合酵母組蛋白去甲基化JMJ2A抗體Human PSMD11 ELISA Kit胰島抗原2抗體/蛋白酪磷抗體(IA-2A)

米根霉組蛋白去甲基化JMJD5抗體Human HNRNPA2B1(Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1) ELISA Kit胰島抗體(ICA)

多育曲霉磷化γ連環(huán)蛋白抗體Human PSG4 ELISA Kit胰島自身抗體(IAA)

布魯氏菌 生物Ⅰ型JNK相互作用蛋白4抗體Human PSAPL1 ELISA Kit胰島原(PI)

小紅酵母Rhodotorula│minuta 質(zhì)量規(guī)格:>92.0%(T)葒草苷

粉紅聚端孢霉Trichothecium│roseum (Pers.) Link 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)野百合堿

尖孢枝孢Cladosporium│oxysporum Berk. & M.A. Curtis 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)(T)桔梗皂苷D
TNE緩沖液NGF ELISA Kit  大鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子規(guī)格: 48T

MIP-3 Alpha/CCL20 ELISA Kit  大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α規(guī)格: 48T

LN ELISA Kit  大鼠層連蛋白/板層su規(guī)格: 48T

IL-6 ELISA KIT   大鼠白介su6規(guī)格: 48T

IL-4 ELISA KIT   大鼠白介su4規(guī)格: 48T


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