詳細介紹
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
可見分光光度法 | 50管/24樣 | AS6321173 |
商品介紹:
商品介紹 測定意義中性蛋白酶是一種蛋白內(nèi)切酶,在一定的溫度和中性pH條件下,能將大分子蛋白質(zhì)分解為多肽及氨基酸等產(chǎn)物。由于其安全無毒、水解能力強、作用范圍廣等特點,中性蛋白酶常用于食品、飼料、化妝品和營養(yǎng)保健品。測定原理中性條件下,中性蛋白酶可將酪蛋白水解產(chǎn)生酪an酸;在堿性條件下,酪an酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍;在680nm有特征吸收峰。實驗中所需儀器及設(shè)備可見分光光度計、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、1ml玻璃比色皿、雙蒸水 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細菌、細胞或組織樣品的制備: 細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
產(chǎn)品優(yōu)點如下:
1、快速簡便:雙試劑,直接操作,快速、簡便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗: X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強。且特異性強,不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當(dāng)時,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
蘆薈新甙D(標準品)英文名: Molecular sieves, 3 ?鳥核苷結(jié)合蛋白X抗體包裝5g
蘆筍(標準品)英文名: Molecular sieves, 3 ?GRAM結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體包裝1g
蘆竹根(標準品)英文名: Molecular sieves, 3 ?γ-谷酰轉(zhuǎn)移輕鏈2抗體包裝250mg
蘆竹堿(標準品)英文名: Molecular sieves, 4 ?原鈣粘蛋白γA1抗體包裝5g
魯斯考皂苷元(標準品)英文名: Molecular sieves, 4 ?G蛋白偶聯(lián)受體70抗體包裝1g
鹿角(標準品)英文名: Molecular sieves, 4 ?G蛋白偶聯(lián)受體71抗體包裝5g
鹿茸(馬鹿)(標準品)英文名: Molecular sieves, 4 ?谷受體δ2/GluR-δ2抗體包裝25g
鹿茸(梅花鹿(標準品)英文名: Molecular sieves, 4 ?血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗體包裝5g
鹿銜草(標準品)英文名: Molecular sieves, 4 ?谷脫羧67抗體包裝1g
路邊青(標準品)英文名: Molecular sieves, 5 ?生長抑制DNA損傷基因45抗體包裝25g
路路通內(nèi)酯(標準品)英文名: Molecular sieves, 5 ?胃泌抑制肽抗體包裝5g
路路通(標準品)英文名: Molecular sieves, 5 ?葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4抗體包裝1g
綠包藤(標準品)英文名: Molecular sieves, 5 ?磷脂酰基蛋白聚糖-3抗體包裝5g
綠茶(茶葉)(標準品)英文名: Molecular sieves, 5 ?糖皮質(zhì)激受體抗體包裝1g
綠萍(標準品)英文名: Molecular sieves, 5 ?胰高血糖樣肽-1抗體包裝5g
: Robinson資源名稱: 問號狀鉤端螺旋體 質(zhì)量規(guī)格:>95%前列腺E2試劑盒毛萼結(jié); Maoecrystal A
球毛殼霉Chaetomium│globosum 質(zhì)量規(guī)格:>99%,可用于培養(yǎng)前列腺E1試劑盒莫諾宗 ;4-Benzyloxyphe
: ATCC35106資源名稱: 大腸埃希氏菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品前列腺D合成試劑盒馬錢堿;Brucine
中性蛋白酶測試盒50管/24樣大麗花輪枝孢 3-(Boc-氨甲基)氮雜環(huán)丁烷鹽酸鹽性別決定區(qū)Y框蛋白1Elisa
布魯氏病(+)陽性血清 1-[2-(trifluoromethoxy)phenyl]ethanol骨骼肌肌動蛋白α1Elisa
孟氏假單胞 D-高苯乙酯鹽酸鹽心肌肌鈣蛋白TElisa
香菇 β-1,3-葡聚糖α橫紋肌肌動蛋白Elisa
莫氏克羅諾桿 Amberlyst® A21 大孔樹脂脊髓灰質(zhì)炎病抗體Elisa
醋化醋桿 聚D-230乙型流感嗜血桿抗體Elisa
戴爾根霉 果聚糖腦膜炎雙球抗體Elisa
紅霉鏈霉 微球核酸 來源于金黃色葡萄球(株ATCC #27735)囊泡單轉(zhuǎn)運蛋白2Elisa
釀酒酵母 Brij® S2 聚氧乙烯硬脂酸酯(Brij 72)無翅型MMTV整合位點家族成員11Elisa
土曲霉 Brij® S2 聚氧乙烯硬脂酸酯(Brij 72)多巴轉(zhuǎn)運蛋白Elisa
短桿狀馬賽 糖酐鐵5-羥色受體4Elisa
香菇 醋酸丁酸纖維5-羥色受體1BElisa
巴氏醋桿 醋酸丁酸纖維眼小畸形關(guān)聯(lián)轉(zhuǎn)錄因子Elisa
明膠樣鏈霉 醋酸丁酸纖維精脫亞Elisa
紫丁香蘑 醋酸丁酸纖維色氨酰tRNA合成Elisa
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。