詳細介紹
產品分類:PCR相關
儲存條件:—20℃,12個月
用途:又稱腺苷二磷酸,各種生化反應中由ATP生成,具有一個高能磷酸鍵。
注意事項:主要由腺苷二磷酸、無菌Tris-HCl組成。
公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
二磷酸腺苷溶液 | 10ml | FS-R7413 |
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現,至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。
5) 之后更換正常培養基培養即可。
墳墓節桿菌磷化核因子抗體Human ORM1(Alpha-1-acid glycoprotein 1) ELISA Kit巨噬替代激活相關化學因子1(AmAC-1)
賴芽孢桿菌磷化核因子抗體Human NOS2/iNOS(Nitric oxide synthase, inducible) ELISA Kit巨噬趨化因子(MCF)
三葉草根瘤菌磷化核因子抗體Human TNNI1(Troponin I, slow skeletal muscle) ELISA Kit巨噬來源的趨化因子(MDC/CCL22)
賴芽胞桿菌屬神經上皮轉化基因1抗體Human IL7R(Interleukin-7 receptor) ELISA Kit巨噬集落激因子受體(M-CSFR)
擬盤多毛孢粘附分子3抗體(脊髓灰質炎病受體相關蛋白3)Human LGALS1(Galectin-1) ELISA Kit巨噬集落激因子(M-CSF)
根霉屬螺旋環螺旋蛋白2抗體Human FABP1(Fatty acid-binding protein, liver) ELISA Kit巨噬激蛋白(MSP)
球孢白僵菌胚胎發育相關蛋白Nodal抗體Human MAP2K1(Dual specificity mitogen-activated protein kinase kinase 1) ELISA Kit鹽抵抗的性磷(TRAP)
地衣芽孢桿菌增殖相關蛋白NANOS1抗體Human IL36G(Interleukin-36 gamma) ELISA Kit相關抗原7(SPAG7)
毛韌革菌同源盒蛋白NOBOX抗體Human SNCA(Alpha-synuclein) ELISA Kit精脒/精N(1)-乙酰轉移樣蛋白1(SATL1)
微球菌轉錄因子NAC1抗體Human PTK2(Focal adhesion kinase 1) ELISA Kit精合成(SRM)
產氣莢膜梭菌 C型神經生長因子受體抗體Human ENPP2(Ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase family member 2) ELISA Kit精酰-tRNA合成(RARS)
根瘤菌磷化KB抑制蛋白激εHuman PSG1(Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 1) ELISA Kit精脫羧(ADC)
耐鹽四聯球菌磷化神經纖毛蛋白1抗體Human NPY(Pro-neuropeptide Y) ELISA Kit精2(ARG2)
紫薇布勒酵母1型神經纖維瘤抗體Human SERPINC1(Antithrombin-III) ELISA Kit精(Arg)
香菇磷化1型神經纖維瘤抗體Human TNNI2(Troponin I, fast skeletal muscle) ELISA Kit精加壓(AVP)
枯草芽胞桿菌枯草亞種中心粒蛋白Nudel抗體Human S100B(Protein S100-B) ELISA Kit精(Arg)
: ivcas7.00198資源名稱: 蘇云金芽孢桿菌 質量規格:>98%,BR槐果堿
: LMG5856=ATCC33914=CECT547=DSM3584=ICMP4298=NCPPB2217資源名稱: Xylophilusampelinus 質量規格:>98%,BR絡塞定
茯苓Poria│cocos 質量規格:BR,4000u/g絡緦
二磷酸腺苷溶液NO(Mouse nitric oxide) ELISA Kit 小鼠一氧化氮規格: 48T
Beta-Nph(Mouse Beta-naphthol) ELISA Kit 小鼠β萘規格: 48T
C3(Mouse Complement 3) ELISA Kit 小鼠補體蛋白3規格: 48T
AZT(Mouse Azidothymidine) ELISA Kit 小鼠疊氮胸規格: 48T
Beta-glucosidase(Mouse Beta-glucosidase ) ELISA Kit 小鼠β葡糖mei規格: 48T