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公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

產品分類：PCR相關

儲存條件：4℃,12個月

用途：增強PCR擴增效率

注意事項：有超純進口甜菜堿及超純水配置而成。

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

金針菇（毛柄金錢菌、冬菇）N-乙酰基轉移2抗體Human APOH(Beta-2-glycoprotein 1) ELISA Kit睫狀神經營養因子(CNTF)

宇佐曲霉富含亮重復結構域蛋白2抗體Human FST(Follistatin) ELISA Kit結核菌(Tuberculin)

熱栗色鏈霉菌孤兒核受體TAK1抗體Human AKT1(RAC-alpha serine/threonine-protein kinase) ELISA Kit結核菌桿抗體IgM(TB-Ab IgM)

玉米黑粉菌骨巢蛋白抗體Human COL15A1(Collagen alpha-1 XV) ELISA Kit結核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)

峨眉山鏈霉菌軸突生長誘向因子5抗體Human SERPINE1(Plasminogen activator inhibitor 1) ELISA Kit結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)

球孢白僵菌磷化p-IκB-α抗體Human PDGFC(Plaet-derived growth factor C) ELISA Kit結合珠蛋白(HPT)

枯草芽孢桿菌G21蛋白質抗體Human INHA(Inhibin alpha chain) ELISA Kit結締組織生長因子(CTGF)

暗黃紫鏈霉菌醌氧化還原抗體Human FGF2(Heparin-binding growth factor 2) ELISA Kit結締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)

枯草芽孢桿菌神經肽Y1受體抗體Human KitLG(Kit ligand) ELISA Kit結蛋白(Des)

淺紫灰鏈霉菌產色變種谷受體1抗體Human TIE1(Tyrosine-protein kinase receptor Tie-1) ELISA Kit結腸癌抗原(CCA)

佛羅里達側耳谷受體調節蛋白2抗體Human TNFSF10(Tumor Necrosis Factor Related Apoptosis Inducing Ligand) ELISA Kit窖蛋白(Cav-1)

溶血 水解1抗體Human CGA(Chromogranin A) ELISA Kit角化生長因子(KGF)

雅致小克銀漢霉神經生長因子誘導蛋白抗體Human FTH1(Ferritin heavy chain) ELISA Kit角化內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)

馬爾他布魯氏菌核孔蛋白50抗體Human FTL(Ferritin light chain) ELISA Kit膠轉蛋白(TAGLN)

鴨疫里氏桿菌軸索過度生長抑制因子-A抗體Human AMH(Muellerian-inhibiting factor) ELISA Kit膠質纖維性蛋白(GFAP)

乳糖細黃鏈霉菌一氧化氮合成-1抗體（神經型）Human RORC(Nuclear receptor ROR-gamma) ELISA Kit膠質源性神經營養因子(GDNF)

嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌Geobacillus│stearothermophilus 質量規格：國7-15 units/mg,來源于地衣芽孢桿菌黃楊堿

牛鏈球菌Streptococcus│bovis 質量規格：>98%,BR丁香

喜溫硫桿狀菌Acidithiobacillus│caldus 質量規格：>98%,標準品黃芪皂苷III
甜菜堿溶液ER(Mouse Estradiol receptor) ELISA Kit  小鼠雌二chun受體規格： 48T

PTHrP(Mouse Parathyroid Hormone Related Protein) ELISA Kit  小鼠jia狀旁腺激su相關蛋白規格： 48T

LPA(Mouse L-phenylalanine) ELISA Kit  小鼠ben丙氨suan規格： 48T

ACA-IgA(Mouse cardiolipin antibody IgA) ELISA Kit  小鼠抗心磷脂IgA規格： 48T

ACA-IgM(Mouse cardiolipin antibody IgM) ELISA Kit  小鼠抗心磷脂IgM規格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5）   之后更換正常培養基培養即可。