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KRBH緩沖液

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更新時間:2022-07-05 10:37:15瀏覽次數(shù):240

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500ml
貨號 FS-R6608 應用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 貨號 FS-R6608
KRBH緩沖液公司正在銷售的產(chǎn)品:豚鼠水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒 Anti-IL3RA Antibody腫瘤壞死因子配體超家族成員18抗體
豚鼠β甘露糖苷酶(β Manase)試劑盒 Anti-IL4 Antibody腫瘤壞死因子受體超家族成員14抗體
豚鼠黑素瘤黏附分子(MCAM)試劑盒Anti-IL4 Antibody磷酸化血管生成素受體2抗體
豚鼠黑色素瘤標記物(MART/Melan-

詳細介紹

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

KRBH緩沖液

500ml

FS-R6608

產(chǎn)品分類:細胞其他

儲存條件:4℃,3個月

用途:全稱為Krebs-Ringer bicarbonate HEPES buffer,主要由HEPES、氯化鈉、碳suan氫鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈣、硫suan鎂等組成。用于動物離體實驗,肌體灌流、清洗組織。并維持離體組織的正常生理功能。

注意事項:無菌溶液,主要防止微生物污染。

63.jpg 

 

配制與標定的實驗原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

13.jpg 

 

實驗方法與判定:

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

levatin Ammonium oxalate hydrateEFHD1蛋白抗體包裝5g

Lup-20(29)-en-28-oic acid, ... Adenosine-5'-monophosphate, free acid突觸結(jié)合蛋白2抗體包裝100g

Monnieriside G Aluminum sulfate, hexadecahydrate核苷焦磷2抗體包裝25g

Multicaulisin Glucose-6-phosphate dehydrogenase長鏈烯脂酰化抗體包裝25g

N-阿魏酰真蛸 Malate dehydrogenase神經(jīng)元,肌肉特異性烯化抗體包裝5g

N-芐基-(9Z,12Z)-十八碳二烯酰 N-Hydroxysuccinimide內(nèi)皮分化型G蛋白偶聯(lián)受體3抗體包裝1g

N-芐基-(9Z,12Z,15Z)-十八碳三烯酰 Gallic acid monohydrate發(fā)育相關(guān)蛋白ERCC6L抗體(乙致畸因子)包裝25g

N-芐基十六烷酰 Gallic acid monohydrate豬源產(chǎn)腸性大腸桿菌K99抗體包裝5g

N-反式-阿魏酰基酪 a-Ketoglutaric acid, disodium salt, dihydrateα內(nèi)磺肽抗體包裝100g

N-反式-對-香豆酰基去辛弗林 Calcium hydroxide磷化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體包裝25g

N-反式-對香豆酰酪(標準品) HPC, hydroxypropyl cellulose表皮生長因子樣激受體1抗體包裝500g

N-基野靛堿(標準品) L(+)Sodium tartrate dihydrateCREB結(jié)合蛋白p300抗體包裝1g

Nudicaucin A Pyridoxamine, dihydrochlorideEB病LMP-2A蛋白抗體包裝5g

Nudicaucin B Sodium salicylateEB病核抗原1抗體包裝25g

Odoratisol A CAPS, sodium salt磷化雌激受體β抗體包裝5g

煙草根黑腐病菌Thielaviopsis│basicola 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR性磷試劑盒肉豆蔻木脂;Myrislignan

護岸植物紅樹桿菌Mangrovibacter│plantisponsor 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品性富亮核磷蛋白32家族成員E試劑盒L-肉堿;L(-)-Carnitine

: AS3.2783資源名稱: 宇佐曲霉 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%性成纖維生長因子試劑盒20(S)-原人參二;Protopan
KRBH緩沖液STAT4 /FITC  熒光標記信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子4IgG

Phospho-Stat4 (Tyr693) /FITC   熒光標記化信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子4IgG

STAT5/FITC  熒光標記信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子5(STAT5)IgG

STAT6 /FITC  熒光標記信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子6IgG

STEAP1/FITC  熒光標記前列腺跨膜上皮抗原1IgG

StAR/StARD1/FITC  熒光標記促黃體激誘導蛋白IgG

STK/CK I Alpha/FITC  熒光標記屬絲/蘇氨蛋白質(zhì)激IgG

STK/CK II Alpha/FITC  熒光標記絲/蘇氨蛋白質(zhì)激IgG

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

 


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