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產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
黑色標(biāo)本保色液 | 2×250ml | FS-R7123 |
產(chǎn)品分類:植物染色
儲(chǔ)存條件:室溫,12個(gè)月
用途:用于植物標(biāo)本的保色。
注意事項(xiàng):有硫酸銅、乙醇等組成。如出現(xiàn)沉淀,可過濾后再使用。在制作保色浸制標(biāo)本后,瓶口要用石蠟或者凡士林密封嚴(yán)實(shí),并避免陽光直射。
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來,保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
小橢圓接合酵母嗜中性粒抗原CD177抗體Human NFATC1(Nuclear factor of activated T-cells, cytoplasmic 1) ELISA Kit人多萜長二磷寡糖蛋白環(huán)糊精糖基轉(zhuǎn)移(DDOST/OST-48)免疫試劑盒
歧皺青霉鈣整合結(jié)合蛋白1抗體Human NEO1(Neogenin) ELISA Kit人多肽YY(Peptide-YY)免疫試劑盒
葉球鞘單胞菌21號(hào)染色體開放閱讀框7抗體Human MADCAM1(Mucosal addressin cell adhesion molecule 1) ELISA Kit人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)免疫試劑盒
谷棒桿菌磷化巨噬集落激因子受體抗體Human PACRG(Parkin coregulated gene protein) ELISA Kit人多聚腺苷二磷核糖聚合(PARP)免疫試劑盒
干酪乳桿菌磷化巨噬集落激因子受體抗體Human CX3CR1(CX3C chemokine receptor 1) ELISA Kit人多功能蛋白聚糖(versican)免疫試劑盒
假單胞菌屬磷化巨噬集落激因子受體抗體Human SNX1(Sorting nexin-1) ELISA Kit人多巴脫羧(DDC)免疫試劑盒
微球菌磷化巨噬集落激因子受體抗體Human NAIP(Baculoviral IAP repeat-containing protein 1) ELISA Kit人多巴-β羥化(DBH)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌松蠋亞種磷化巨噬集落激因子受體抗體Human JUP(Junction plakoglobin) ELISA Kit人多巴D1受體(D1R)免疫試劑盒
飼料 鉛磷化巨噬集落激因子受體抗體Human CFL1(Cofilin-1) ELISA Kit人多巴(DA)免疫試劑盒
南方散斑殼微管結(jié)合蛋白CYLD抗體Human LGALS3BP(Galectin-3-binding protein) ELISA Kit人對(duì)氧磷-3(PON3)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化微管結(jié)合蛋白CYLD抗體Human CFLAR(CASP8 and FADD-like apoptosis regulator) ELISA Kit人對(duì)氧磷(PON)免疫試劑盒
異常漢遜酵母異常變種磷化CBX5抗體Human ADCYAP1R1(Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide type I receptor) ELISA Kit人對(duì)稱二甲基精(SMDA)免疫試劑盒
突散囊菌霉抗體Human PPA1(Inorganic pyrophosphatase) ELISA Kit人對(duì)基甲(PABA)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌磷化受體酪激c-Abl抗體Human RET(Proto-oncogene tyrosine-protein kinase receptor Ret) ELISA Kit人端粒重復(fù)序列結(jié)合因子2(TERF2)免疫試劑盒
赤曲霉磷化質(zhì)膜微囊蛋白-1抗體Human CASR(Extracellular calcium-sensing receptor) ELISA Kit人端粒重復(fù)序列結(jié)合因子1(TERF1)免疫試劑盒
橢圓孫秀芹氏菌磷化周期依賴激2抗體Human VIPR2(Vasoactive intestinal polypeptide receptor 2) ELISA Kit人端粒逆轉(zhuǎn)錄(TERT)免疫試劑盒
巨大芽孢桿菌 ABacillus│megaterium A de Bary 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品湖貝;YY90410梭砂貝母堿
傳染性法氏囊病病毒Avibirnavirus│Infectious bursal disease virus 質(zhì)量規(guī)格:AR白花前胡乙
巨大芽孢桿菌Bacillus│megaterium de Bary 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)小豆蔻明
黑色標(biāo)本保色液2,3-DPG(Human 2,3-Disphosphoglycerate,2) ELISA Kit 人2,3-二磷suan甘油suan規(guī)格: 48T
LUM(Human lumican) ELISA Kit 人基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白規(guī)格: 48T
NHE3(Human Na+/H+ exchanger 3) ELISA Kit 人Na+/H+交換體3規(guī)格: 48T
OFQ/N(Human orphanin FQ/nociceptin) ELISA Kit 人孤腓肽規(guī)格: 48T
ST1(Human Stromelysin-1) ELISA Kit 人基質(zhì)裂解su規(guī)格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。