核酮糖1,5-二磷酸羧化酶提取試劑公司正在銷售的產(chǎn)品：兔甘露糖受體(MR)試劑盒 Anti-Gsta3 Antibody羥化酶抗體
兔球蛋白A1 (IgA1)試劑盒Anti-GSTM1 Antibody酶抗體
兔可溶性腺苷酸環(huán)化酶(sAC)試劑盒Anti-GSTA1/A2/A3/A4/A5 Antibody胸腺素β10抗體
兔芳基硫酸酯酶A(ARSA)試劑盒 Anti-GSTM3 Antibod

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類：細(xì)胞組分分離

儲(chǔ)存條件：4℃,6個(gè)月

用途：主要用于裂解植物組織，提取樣品中的核酮糖1,5-二磷酸羧化酶

注意事項(xiàng)：一種酶(EC 4.1.1.39)，分子量約為53kD，由8個(gè)大亞基和8個(gè)小亞基組成，是光合作用中決定碳同化速率的關(guān)鍵酶，該酶活力的大小反應(yīng)了植物光合能力的強(qiáng)弱，RUBP羧化酶是光合作用碳代謝中的重要的調(diào)節(jié)酶，主要存在于葉綠體的可溶部分，總量占葉綠體可溶蛋白50-60%。在植物葉片發(fā)育過程中，此酶活性呈規(guī)律性的變化，在植物衰老或遭受環(huán)境脅迫時(shí)，酶活性呈下降趨勢(shì)。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

他環(huán),烯土霉(標(biāo)準(zhǔn)品) Amlodipine角蛋白13抗體包裝25g

托宗(標(biāo)準(zhǔn)品) Amlodipine白免疫球蛋白樣受體-B抗體包裝500g

雄諾龍（標(biāo)準(zhǔn)品） NizatidineCD33L抗體包裝100g

門冬胰島（標(biāo)準(zhǔn)品） Carboxymethyl cellulose 角蛋白10抗體包裝25g

（標(biāo)準(zhǔn)品） Fludarabine軸突生長(zhǎng)因子CD108抗體包裝5g

(標(biāo)準(zhǔn)品) Fludarabine唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集5抗體包裝1g

咪喹莫特（標(biāo)準(zhǔn)品） G-418 disulfate,GeneticinCD329抗體包裝1g

咪唑（標(biāo)準(zhǔn)品） Erlotinib嗜粒趨化蛋白14抗體包裝1g

咪唑煙(標(biāo)準(zhǔn)品) N-Acetyl-cysteine1號(hào)染色體開放閱讀框57抗體包裝250mg

米(標(biāo)準(zhǔn)品) Zopiclone2號(hào)染色體開放閱讀框18抗體包裝100ml

米奈鈣(標(biāo)準(zhǔn)品) Zopiclone色c氧化6抗體包裝100g

(標(biāo)準(zhǔn)品) Aniracetam嗜粒趨化蛋白24抗體包裝25g

米諾地爾（硫鹽）敏樂啶(標(biāo)準(zhǔn)品) Aniracetam巨噬炎性蛋白15包裝100ml

米屈肼(標(biāo)準(zhǔn)品) L-Glutamine巨噬炎性蛋白抗體包裝500ml

米替福新(標(biāo)準(zhǔn)品) RoflumilastCD72蛋白抗體包裝1g

擬青霉屬Paecilomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>720IU/MG,BR膜DNA抗體試劑盒1-脫氧野尻霉;1-Deoxynoji

醋化醋桿菌Acetobacter│aceti 質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定角蛋白21-1片段試劑盒;Tacrolimus

肺炎克雷伯氏菌Klebsiella│pneumoniae 質(zhì)量規(guī)格：EP/USP角蛋白18-M65試劑盒10－脫乙酰基巴丁III;10-Dea
核酮糖1,5-二磷酸羧化酶提取試劑PDK1(phospho Y373 + Y376) /FITC  熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化3肌依賴性蛋白激1IgG2-酰吡啶 Standard for GC ,≥99.5% (GC)

Phospho-PDK1 (Ser241) /FITC  熒光標(biāo)記化3肌依賴性蛋白激1IgG1-己硫 96%

Pdk4/FITC  熒光標(biāo)記酮脫氫激4IgG2,3-戊二酮 98%

Pdx1/FITC  熒光標(biāo)記胰十二指腸同源異型盒因IgG2,4-二羥苯酮 99%

PEA3/FITC  熒光標(biāo)記多瘤促活化因子IgG2,6-二羥苯酮 99%

PEA15/FITC  熒光標(biāo)記星形膠質(zhì)PEA15IgG三(3,6-二氧雜庚) 95%

Phospho-PEA15 (Ser4)/FITC  熒光標(biāo)記化星形膠質(zhì)PEA15IgG AR

Phospho-PEA15 (Ser116) /FITC  熒光標(biāo)記化星形膠質(zhì)PEA15IgG 99.99% metals basis

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。